液相色谱分析中如何才能提高分离度？
阅读：7发布时间：2025-3-25
液相色谱分析中如何才能提高分离度？
柱效(Efficiency)
.折射出色谱柱柱子的性能，柱子效果越好，分离的条件***越好，在其它恒定的条件情况下，如果塔板数增加了一倍，但是分离度大约只会提高百分之40%。我们在操作过程中，可以通过下面的方法来提高色谱分析的效果。首先，需要使用长的色谱柱柱管或者拿2个色谱柱来反应色谱柱的性能。柱子的效率越高。说明分离条件***越好，还有一个***是使用粒径填料的色谱柱，但是这个需要耐更高压力的液相色谱系统。所以两者之间一对比，后面的情况更为可观。
选择性(selectivity)
是指色谱柱-流动相体系分离两个化合物的能力。选择性主要与固定相、流动相组成以及柱温等因素有关，与保留值也密切相关，其中固定相和流动相组成影响较大。以***常见的反相模式为例，反相柱(包括C18、C8、PH等)是以分配作用对化合物进行保留的，不同化合物的分离是基于它们在键合相与流动相中分配系数的差异，如果两种化合物的水溶性、在烷烃-水体系的分配系数等方面存在明显差异，那么这些化合物通常是能够利用反相柱达到分离；PH柱对具有苯环的化合物具有特殊保留。正相模式下，硅胶柱、胺基柱、氰基柱与带有极性基团的化合物之间存在极性相互作用，对化合物的基团具有选择性，常常用于结构类似物、异构体化合物的分离。流动相方面，降低流动相的洗脱强度通常可以增大分离度；而有机溶剂类型也会影响分离，比如反相条件下，乙腈和甲醇的选择性***存在很大差异，这种差异需要在实践中摸索，但无论如何，多种溶剂类型带给我们更多的实现分离的可能。
容量因子
随着容量因子k的增大，分离度也随之增加，这种影响在k值较低时非常明显，当k值大于10时，k值增加对分离度的影响***不再显著，这***告诫无原则地提高k值以增大分离度是没有意义的。增加键合相密度能够提高k值；另外改变键合基团类型也能改变k值，比如在反相色谱中，随着键合相碳链长度的增加，k值逐渐增大。
分离度，指相邻两峰的保留时间之差与平均峰宽的比值.也叫分辨率,表示相邻两峰的分离程度.
R越大,表明相邻两组分分离越好.一般说当R＜1时,两峰有部分重叠；当R=1.0时,分离度可达98%；当R=1.5时,分离度可达99.7%.通常用R=1.5作为相邻两组分已******分离的标志.当R＝1时,称为4σ分离,两峰基本分离,裸露峰面积为95.4%,内侧峰基重叠约2%.R＝1.5时,称为6σ分离,裸露峰面积为99.7%.R≥1.5称为******分离.《中国药典》规定R应大于1.5.
