Cas9稳定表达的人胰腺癌细胞；PANC-1-Cas9-555操作步骤 返回列表页

Cas9稳定表达的人胰腺癌细胞；PANC-1-Cas9-555操作步骤操作步骤：
1）贴壁细胞传代：提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热，用75%酒精擦拭后再放入超净台内，吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液，加少量PBS润洗细胞，加入适量*，使*的量能盖住细胞，37℃孵育，每隔2~3min显微镜下观察，待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去*，加入新鲜培养基，晃动细胞瓶，终止*作用，用吸管小心吹打贴壁的细胞，制成细胞悬液。控制吹打的力度，避免产生大量的气泡，将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养，隔天观察贴壁生长情况。
2）悬浮细胞传代：将细胞悬液转移到无菌离心管内，1000rpm离心5min，弃去上清，加入新鲜的培养基，用吸管小心吹散沉淀，制成细胞悬液，将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养。

细胞名称   Cas9稳定表达的人胰腺癌细胞；PANC-1-Cas9-555操作步骤
形态特性 上皮样；多角形

生长特性 贴壁生长

特征特性 该细胞是采用慢病毒感染的方式使PANC-1细胞稳定表达Cas9-Flag-Neo，经400ug/mlG418筛选得到的单克隆，经Western Blotting验证该克隆可以表达Cas9蛋白，可直接用Crispr技术编辑基因组DNA。

培养条件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS；400ug/ml G418

传代方法 1:2~1:4传代；每周2~3次。

传代情况 C3

冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS

支原体检测 培养法（-）

STR Amelogenin：x,x；CSF1PO：10,12；D12S391：22,22；D13S317：11,11；D16S539：11,11；D18S51：12,12；D19S433：11,16；D21S11：28,28；D2S1338：23,24；D3S1358：17,17；D5S818：11,13；D6S1043：11,12；D7S820：8,10；D8S1179：14,15；FGA：21,21；；Penta E：7,14；TH01：7,8；TPOX：8,11；vWA：15,15；

同工酶

染色体

使用权限 A类

Cas9稳定表达的人胰腺癌细胞；PANC-1-Cas9-555操作步骤细胞培养
1、冷冻管应如何解冻？
取出冷冻管后， 须立即放入37 ℃水槽中快速解冻， 轻摇冷冻管使其在1 分钟内全部融化， 并注意水面不可超过冷冻管盖沿， 否则易发生污染情形。另冷冻管由液氮桶中取出解冻时， 必须注意安全， 预防冷冻管之爆裂。
2、细胞冷冻管解冻培养时， 是否应马上去除DMSO？
除少数特别注明对DMSO 敏感之细胞外， 绝大部分细胞株（包括悬浮性细胞）， 在解冻之后， 应直接放入含有10-15ml新鲜培养基之培养角瓶中， 待隔天再置换新鲜培养基以去除DMSO 即可， 如此可避免大部分解冻后细胞无法生长或贴附之问题。
3、可否使用与原先培养条件不同之培养基？
不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基， 若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基， 细胞大都无法立即适应， 造成细胞无法存活。
4、可否使用与原先培养条件不同之血清种类？
不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源， 所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生*的影响。来自不同物种的血清， 在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同，血清使用错误常会造成细胞无法存活。
人恶性非霍奇金淋巴瘤患者的自然杀伤细胞;NK-92 [NK92]

TGFBR3 Others Mouse 小鼠 TGFBR3 / Betaglycan 人细胞裂解液 (阳性对照)

NCI-H446 人小细胞肺癌细胞

hDPSCs, 人前磨牙牙髓干细胞

人脐动脉平滑肌细胞

人正常上皮细胞;MCF 10A 人胰腺星状细胞*培养基 100mL
SHPK Others Human 人 CARKL / SHPK 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)

CM-H055人卵巢上皮细胞*培养基100mL

人中脑星形胶质细胞HA-mb

非洲绿猴肾细胞系/HCV-NS2;Vero-HCV-NS2 人癌细胞，HCC1428细胞 LTEP-a-2(肺腺癌细胞)

人成骨肉瘤细胞;Saos-2

OLFM4 Others Human 人 OLFM4 / Olfactomedin-4 人细胞裂解液 (阳性对照)
CM-H055人卵巢上皮细胞*培养基100mL

SHPK Others Human 人 CARKL / SHPK 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)

人中脑星形胶质细胞HA-mb

非洲绿猴肾细胞系/HCV-NS2;Vero-HCV-NS2 人癌细胞，HCC1428细胞 LTEP-a-2(肺腺癌细胞)

人成骨肉瘤细胞;Saos-2

OLFM4 Others Human 人 OLFM4 / Olfactomedin-4 人细胞裂解液 (阳性对照)
菌种保存培养基  进口分装  四氢姜黄素   Tetrahydrocurcumin  号：  36062-04-1  质量规格：  HPLC≥98%,BR

BF839菌计数选择培养基  进口分装  LY2886721   LY-2886721  号：  1262036-50-9  质量规格：  >98，BACE1 inhibitor

PyridoxineYmedium  进口分装  美芬诺  Mephenoxalone  号：  25754  质量规格：  >98%

CelluloseC
大鼠C型钠尿肽elisa试剂盒  进口分装  呫吨酸（标准品）  Xanthene-9-carboxylic acid  号：  31963  质量规格：  供检查用

大鼠C反应蛋白elisa试剂盒  进口分装  呫吨（标准品）  Xanthone  号：  97-47-1  质量规格：  供HPLC法有关物质检查用

大鼠D-乳酸脱氢酶elisa试剂盒  进口分装  正己酸（标准品）  Hexanoic acid  号：  142-62-1  质量规格：  鉴别

大鼠E钙黏蛋白elisa试剂盒  进口分装  甲基*（标准品）  Methyl eugenol  号：  93-15-2  质量规格：  含量测定
Cas9稳定表达的人胰腺癌细胞；PANC-1-Cas9-555操作步骤D49mm透析袋(透析分子量12000-14000)  进口分装  Fluorescein,DisodiumSalt

1ml一次性注射器(100支/盒)  进口分装  葡萄糖-6-磷酸脱氢酶

10×TBS  进口分装  Hemoglobin,FromBovilood

1MTrispH6.8  进口分装  INT

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