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肌卫星细胞培养方法及注意事项

时间:2018-1-30阅读:180
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肌卫星细胞介绍

肌肉卫星细胞是骨骼肌中具有分化增殖潜能的肌源性干细胞,由Mauro在对青蛙胫前肌的电镜研究中发现。卫星细胞位于骨骼肌细胞基膜与肌膜之间,属单核细胞,胞核扁圆,紧贴于肌膜,,核内异染色质较稀疏,细胞质较少。卫星细胞在正常状态下处于静止期,当肌肉受损、坏死或负荷过重时,该细胞被激活,开始增殖有丝分裂、分化功能蛋白的表达并融合成多核,后形成肌纤维。大量研究证实,卫星细胞对骨骼肌受创伤后肌纤维的再生和修复起着重要的作用。

细胞特性

1)来源:6天左右的C57BL/6小鼠

2)含量:>5x105个/mL

3)鉴定:Desmin、α-SCA免疫荧光染色法

4)纯度:>85%

5)污染:支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性

6)规格:1mL冻存管包装

运输和保存: 1mL冻存管干冰运输。

细胞使用:仅供科研使用。

肌卫星细胞培养方法

1)*培养基:小鼠肌卫星细胞培养基

培养方式:不规则细胞,贴壁培养

注意事项:

1.收到细胞后,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们。

2.收到细胞先不开瓶盖,瓶身擦拭酒精后放在培养箱静置2-4小时(视细胞密度而定)稳定细胞状态。接着在倒置显微镜下观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收细胞时就整体外观拍一张照片,观察培养基的颜色和是否有漏液情况,随后在显微镜下拍下细胞状态,100*,200*各一张),观察记录细胞在运输过程中是否有污染情况。作为我方进行销售依据。

3.由于细胞状态受环境、操作和运输等多方面因素影响,故本公司只保证客户收到细胞后一周内的细胞状态,故客户需要售后时需出示收到细胞的时间证明及客户提供收货时间和发现问题后客服人员沟通的时间证明,期间间隔时间不能大于7天。

4.肌卫星细胞所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。

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