细胞凋亡检测扩增方法

细胞凋亡检测是组成间质和上皮–血管中基质的不溶性结构成分。它不仅是细胞的机械支持结构, 也是供给营养和免疫应答的场所。ECM参与调节胚胎发育进程, 决定细胞的黏附与迁移, 在创伤修复和纤维化、细胞的生长、增殖、分化、代谢和肿瘤发生及转移中均起着重要作用。作为MSCs微环境的一个重要组成部分, 研究发现在纤维黏连蛋白铺层的培养皿中扩增的MSCs, 可以更好地维持多向分化能力。近, 陈晓东课题组建立了一种采用MSCs细胞外基质铺层培养骨髓MSCs的方法, 该培养技术系统模拟了MSCs的胞外基质成分, 同时还可能保留了生长因子等活性成分, 可使干细胞的扩增效率得到明显提高。这一培养体系的基本操作是首先在普通培养皿中培养骨髓基质细胞(stromal cell), 待细胞长满后去除活细胞, 保留细胞分泌的胞外基质成分, 随后以此培养皿为载体, 进一步培养扩增新的 MSCs。该研究不仅证实了胞外基质在骨髓MSCs微环境中的重要作用, 同时也为研究干细胞微环境提供了重要的体外模型。

值得指出的是, 虽然胞外基质诱导MSCs增殖的方法*, 但扩增效率很不稳定, 不同代次和状态的细胞制备出来的细胞外基质之间的MSCs扩增效率有较大差异, 高代次的年老细胞制备的基质明显不如低代次的年轻细胞。有趣的是, Chen等的工作也揭示了骨髓源ECM与其他细胞外基质一样也是由纳米级的超细纤维构成的这一基本事实, 如图1所示。他们的工作提示, 基于模拟细胞凋亡检测微环境的ECM的干细胞培养和扩增方法, 将为大规模扩增具高度功能性的MSCs提供新的思路并有着较高的可行性。因此, 进一步分析胞外基质中的关键成分以指导对仿生支架材料的修饰, 进而建立规模化的干细胞培养和扩增的微环境十分必要。
Valproic Acid     500mg    99-66-1     丙戊酸标准品
Zolazepam Hydrochloride    500mg    33754-49-3     盐酸唑拉西泮标准品
Methyl Linoleate     5×50mg    112-63-0     *甲酯标准品
Methyl Linolenate     5×50mg    301-00-8     亚麻酸甲酯标准品
Insulin Lispro    5.97mg    133107-64-9     赖脯胰岛素标准品(2-8℃)
    5.25oz        氟化牙粉：单氟磷酸钠(1500 ppm)/二氧化硅标准品
    5 vials    50-56-6     羟可待酮标准品
Corticotropin    5 vails    9002-60-2    促肾上腺皮质激素标准品
    4vials    04-93-9     盐酸*标准品
    4oz        氟化牙粉：氟化钠/*粉标准品
    4oz        氟化牙粉：氟化亚锡-二氧化硅标准品
细胞凋亡检测