细胞培养方法之微量测序

细胞培养测序已成为蛋白质分析和鉴定的基石，可以提供足够的信息。 尽管氨基酸组分分析和肽质指纹谱（PMF）可鉴定由2-DE分离的蛋白，但普通的N-末端Edman降解仍然是进行鉴定的主要技术。 目前已实现蛋白质微量测序的自动化。 首先使经凝胶分离的蛋白质直接印迹在PVDF膜或玻璃纤维膜上，染色、切割，然后直接置于测序仪中，可用于subpicomole水平的蛋白质的鉴定。 但有几点需注意：Edman降解很缓慢，序列以每40 min 1个氨基酸的速率产生；与质谱相比，Edman降解消耗大；试剂昂贵，每个氨基酸花费3～4$。 这都说明泛化的Edman降解蛋白质不适合分析成百上千的蛋白质。 然而，如果在一个凝胶上仅有几个有意义的蛋白质，或者如果其他技术无法测定而克隆其基因是必需的，则需要进行泛化的Edman降解测序。
近来，应用自动化的Edman降解可产生短的N-末端序列标签，这是将质谱的序列标签概念用于Edman降解，业已成为一种强有力的蛋白质鉴定。 当细胞培养对Edman的硬件进行简单改进，以迅速产生N-末端序列标签达10～20个/d，序列检签将适于在较小的蛋白质组中进行鉴定。若联合其他的蛋白质属性，如氨基酸组分分析、肽质质量、表现蛋白质分子量、等电点，可以更加可信地鉴定蛋白质。 选择BLAST程序，可与数据库相配比。 目前，采用一种Tagldent的检索程序，还可以进行种间比较鉴定，又提高了其在蛋白质组研究中的作用。
Cefepime Hydrochloride    *标准品    123171-59-5    500mg
    苯氧基乙醇标准品    122-99-6     500mg
Doxepin Hydrochloride    盐酸*标准品    1229-29-4    500mg
Benzethonium Chloride    苄索氯铵标准品    121-54-0    500mg
Gadoteridol     钆特醇标准品    120066-54-8     500mg
Flumazenil Related Compound C    *相关物质C标准品    1188-33-6     500mg
Homosalate     原膜散酯标准品    118-56-9     500mg
    柳酸苯酯熔点标准物标准品    118-55-8     500mg
Paramethadione    对甲双酮标准品    115-67-3     500mg
Methyl Oleate     油酸甲酯标准品    112-62-9     500mg
    *相关物质A标准品    112537-96-9     500mg
细胞培养