细胞凋亡检测形态学特征和生化特征

细胞凋亡检测染色体DNA 以核小体为单位的切割导致细胞不可逆死亡。可以采用Nucleosome ELISA，对产生的单体及寡聚核DNA *段进行定量。核小体的DNA 成分被捕获于酶标板上，使用*标记的抗组蛋白抗体检测捕获的核小体数量。组蛋白-DNA *段的量反应了一个特定样品中死亡及濒临死亡的细胞的量。

    DNA *段也可通过片段末端标记进行原位检测，DNA *段末端标记可通过荧光染料或比色底物方法进行检测。另外，细胞形态的变化如胞膜皱摺或出泡、核染色质致密、胞质浓缩等，都可作为细胞凋亡的证据。采用荧光染料进行末端标记的可用流式细胞技术进行定量，其光散射变化也可支持由单一参数得出的结论。DNA *段可以从凋亡细胞中分离（Suicide TrackTM DNA ladder Isolation Kit, ）并使用琼脂糖电泳进行分析。约180bp 的多倍寡核小体片段在电泳上呈典型的梯状条带，可进一步证实凋亡的存在。若使用Pellet Paint Co-Precipitant，只需室温操作，两分钟即帮助DNA 沉淀更快捷方便。

    线粒体膜电位和膜通透性的变化也是凋亡细胞一个重要特点。可使用Cytochrome c ELISA Kit或Cytochrome c Release Apoptosis Assay Kit试剂盒检测凋亡细胞线粒体所释放的*。也可使用Cytosol/Mitochondria Fractionation Kit分离凋亡细胞线粒体，其膜电位可通过MitoCaptureTM Apoptosis Detection Kit检测。细胞凋亡检测另一个生化特征是细胞膜内侧的磷脂酰*从胞质转至胞外。膜联蛋白中的Annexin Ⅴ，是一种磷脂结合蛋白，与磷脂酰*有强亲和力。通过使用Annexin Ⅴ-FITC或 Annexin Ⅴ-Biotin ,Apoptosis Detection Kit ，及RAPIDTM 方法进行凋亡细胞早期检测。可使用流式细胞仪或荧光显微镜监测。同时使用PI，根据细胞膜的通透性区分早期凋亡细胞和坏死细胞。

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