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提高蛋白酶抑制剂的转染效率的原因

时间:2018-5-14阅读:296
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为了提高蛋白酶抑制剂的转染效率,可以使用非脂质体的转染试剂,如engreen的Entranster试剂,纳米材料的。也可以使用电转染方法,针对悬浮细胞等难转染细胞还是挺不错的,电击对细胞有一定的损伤,选用具有细胞膜修复功能的电转染试剂,可以将电击对细胞的伤害降到低,如Entranster-E。

悬浮细胞不易转染,是因为选对试剂及良好的细胞培养环境。

悬浮细胞是指细胞生长不依赖支持物表面,在培养液中呈悬浮状态生长,如淋巴细胞。在实验室经常会遇到悬浮细胞的转染,其和贴壁细胞转染还是有很大不同的。

目前大多数实验室用的是脂质体类的转染试剂,脂质体转染是基于电荷吸引原理,先形成脂质体-DNA复合物,散布在细胞周围,然后通过细胞的内吞作用,将目的基因导入细胞内,而脂质体复合物与贴壁细胞的接触机会比悬浮细胞高出很多倍,所以,脂质体转染时悬浮细胞的转染效率要明显低于贴壁细胞。

其次,脂质体试剂的毒性较大,这就使得悬浮细胞的转染更为困难了。另外,悬浮细胞不易培养,易死亡,也给细胞转染造成了一定的困难。
蛋白酶抑制剂不易转染,选对试剂及良好的细胞培养环境才是关键。

 巨噬细胞移动抑制因子IgG 人唾液酸(SA) 

 聚集蛋白IgG 人脱氧尿三磷酸(DUTP) 

 聚*/抗His tag(C端)标签IgG 人脱氧胶原吡啶交联(DPD)

 聚*/抗His tag标签IgG 人脱氧核糖核酸酶Ⅰ(DNase-Ⅰ)

 抗“衰老关键蛋白”IgG 人脱氧吡啶酚/脱氧吡啶啉(DPD)

 抗“衰老关键蛋白”IgG 人脱氢表雄酮S7(DHEA-S7)

 抗6-磷酸*脱氢酶IgG 人透明质酸(HA)

 抗Ⅱ型胶原IgG 人脱氢表雄酮(DHEA)
蛋白酶抑制剂

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