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丙二醛(MDA)检测试剂盒100T实验方法使用注意事项
1.微量试剂取用前请离心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿*、戴手套等。
4.本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不*用于检测组织样本。
产品名称:丙二醛(MDA)检测试剂盒100T实验方法
储存条件:2-8℃避光保存。
有效期:一年。
产品简介:
机体通过酶系统与非酶系统产生氧自由基,后者能攻击生物膜中的多不饱和脂肪酸(polyunsaturatedfattyacid,PUFA),引发脂质过氧化作用,并因此形成脂质过氧化物。如:醛基(丙二醛MDA)、酮基、羟基、羰基、氢过氧基或内过氧基,以及新的氧自由基等。脂质过氧化作用不仅把活性氧转化成活性化学剂,即非自由基性的脂类分解产物,而且通过链式或链式支链反应,放大活性氧的作用。因此,初始的一个活性氧能导致很多脂类分解产物的形成,这些分解产物中,一些是无害的,另一些则能引起细胞代谢及功能障碍,甚至死亡。氧自由基不但通过生物膜中多不饱和脂肪酸(PUFA)的过氧化引起细胞损伤,而且还能通过脂氢过氧化物的分解产物引起细胞损伤。因而测试MDA的量常常可反映机体内脂质过氧化的程度,间接地反映出细胞损伤的程度。MDA的测定常常与SOD的测定相互配合,SOD活力的高低间接反应了机体清除氧自由基的能力,而MDA的高低又间接反应了机体细胞受自由基攻击的严重程度。
丙二醛(MDA)检测试剂盒100T实验方法操作方法
1.悬浮细胞离心(2000rpm离心5min)收集;贴壁细胞用*消化收集用PBS洗涤细胞二次(2000rpm离心5min)收集1~5×105细胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混匀;室温、避光、反应5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer悬浮细胞;
4.请在1 hour内,进行下述荧光显微镜或流式细胞仪的观察和检测。
A.荧光显微镜观察
1.滴一滴上述染色后的细胞悬液于载玻片上,并用盖玻片盖上细胞;
2.对于贴壁细胞来说,也可直接用盖玻片来培养细胞并诱导细胞凋亡;
(1)将细胞于盖玻片上生长,用适当的凋亡诱导剂诱导细胞凋亡,并设立阴性对照组;
(2)用PBS洗涤细胞两次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混匀;
(4)将上述溶液滴加于盖玻片表面,使长有细胞的盖玻片表面均匀覆盖;
(5)避光、室温反应5 min。
3.将盖玻片倒置于载玻片上,于荧光显微镜下观察激发波长546nm,发射波长647 nm,7-AAD荧光信号呈红色。
B.流式细胞仪分析
用流式细胞仪检测,激发波长Ex=546 nm; 发射波长Em=647 nm。
7-AAD红色荧光建议使用FL3通道检测。
丙二醛(MDA)检测试剂盒100T实验方法实验步骤
贴壁细胞需用0.25%的*消化。注意过度消化可损伤细胞。在消化时可加2%的BSA可防止消化过度。如果用含EDTA的*消化时,注意必须*清除EDTA:在标记前用1×PBS或1×bindingbuffer洗涤,清除EDTA,以免残余的EDTA与Ca2+螯合,影响Annexin V的结合。
(1)用去离子水将10×Binding Buffer稀释成1×Binding Buffer;
(2)细胞收集。悬浮细胞收集:离心5分钟;贴壁细胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化时间不宜过长,否则会影响细胞膜上磷脂酰*与Annexin V-FITC的结合),于室温2000rpm离心5~10分钟,收集细胞;
(3)细胞洗涤:用预冷1×PBS(4℃)重悬细胞一次,2000rpm离心5~10分钟,洗涤细胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 悬浮细胞;
(5)Annexin V-FITC标记:加入5μL的Annexin V-FITC混匀后,避光,室温孵育15分钟;
(6)PI标记:上机前5分钟再加入5μL的PI染色。
(7)上机前,补加200μL的1×Binding Buffer。
垂盆草Sedum sarmentosum Sarmentosin 垂盆钞草甙(治肝炎药),垂盆草甙 71933-54-5 C11H17NO7 ≥95%
升麻速Cimifugin20mg/支
柴胡皂苷C;柴胡皂甙C Saikosaponin C 20736-08-7 20mg HPLC≥98% 用于含量测定
含量测定*100686-200401常温,避光100mg
*相关物质B标准品15883-20-250mg
165450-17-9 纽甜标准品 200mg
靛蓝Indigo48-89-320mg
Secoisolariciresinol 开环异落叶松树脂酚 29388-59-8
Benoxinate xy7nochloride*标准品5987-82-6200mg*标准品
* E ;cucurbitacin 18444-66-1 10mg 订购|咨询
结香花Edgeworthia chrysantha Lindl Tiliroside 银锻苷 20316-62-5 C30H26O13 ≥98%
右旋龙脑D-bornqol207-70-020mg
毛地黄素 Digitaline 20mg HPLC≥98% 用于含量测定
对照品*S130539-200301系统适应性
2,3,5,4-四羟基二本葡萄糖苷;何首乌苷 2,3,5,4-tetraxy7noxyl dipxenyletxylene-2-o-glucoside 82373-94-2 20mg HPLC≥98% 暂无简介
细菌总数显色培养基shēng huà shì jì容量:50张/盒
聚氧丙烯聚氧共聚物Polyetxylene-polypropylene glycol
甲氧基钠,英文名或英文缩写:wo7ium metxoxide,级别:BR,99%,规格:1克
孟加拉红培养基 Rose Bengal Medium Null 250G 培养基
二基锌(约1mol/L的己烷溶液) Diqthylzinc 227-0-0
4-基本以酮shēng huà shì jì容量:500ul*100支
蔗糖 Sucrosq(100Mg) 27-20-1
2,3-Dichloropyridine-4-boronic acid 951677-39-7
* Theophylline (≥98%,HPLC) 58-55-9 50MG 标准品
L-色酸/L-胰化蛋白基酸/L-色基酸/L-2-基-3-吲哚基-1-丙酸/L-基吲哚丙酸/L-Tryptophan BR,99% 10克 国产/进口
丙二醛(MDA)检测试剂盒100T实验方法RNASEINHIBITOR*CLDPAK*RNase抑制剂生物技术级10KUCOLD
79-19-6硫代基脲;基硫脲;硫脲ThioseMicarbazide;HydrcarbothioaMide
4-nitnoaniline4-硝基本胺25克BS
一氧化锰 Manganese monoxide 1344-43-0 100G 通用试剂
六溴环十二烷 1,2,5,6,9,10-Hexabromocyclododecane,95% 3194-55-6 25G 通用试剂
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