丙二醛（MDA）检测试剂盒100T实验方法 返回列表页

丙二醛（MDA）检测试剂盒100T实验方法使用注意事项
1．微量试剂取用前请离心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD为潜在致癌物，操作时请采取防护措施，穿*、戴手套等。
4．本试剂盒适用于检测活细胞，流式细胞仪检测时，细胞数量不以应低于1×105，，不*用于检测组织样本。
产品名称：丙二醛（MDA）检测试剂盒100T实验方法
储存条件：2-8℃避光保存。

有效期：一年。

产品简介：

机体通过酶系统与非酶系统产生氧自由基，后者能攻击生物膜中的多不饱和脂肪酸（polyunsaturatedfattyacid,PUFA），引发脂质过氧化作用，并因此形成脂质过氧化物。如：醛基（丙二醛MDA）、酮基、羟基、羰基、氢过氧基或内过氧基，以及新的氧自由基等。脂质过氧化作用不仅把活性氧转化成活性化学剂，即非自由基性的脂类分解产物，而且通过链式或链式支链反应，放大活性氧的作用。因此，初始的一个活性氧能导致很多脂类分解产物的形成，这些分解产物中，一些是无害的，另一些则能引起细胞代谢及功能障碍，甚至死亡。氧自由基不但通过生物膜中多不饱和脂肪酸（PUFA）的过氧化引起细胞损伤，而且还能通过脂氢过氧化物的分解产物引起细胞损伤。因而测试MDA的量常常可反映机体内脂质过氧化的程度，间接地反映出细胞损伤的程度。MDA的测定常常与SOD的测定相互配合，SOD活力的高低间接反应了机体清除氧自由基的能力，而MDA的高低又间接反应了机体细胞受自由基攻击的严重程度。

丙二醛（MDA）检测试剂盒100T实验方法操作方法
1．悬浮细胞离心（2000rpm离心5min）收集；贴壁细胞用*消化收集用PBS洗涤细胞二次（2000rpm离心5min）收集1~5×105细胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混匀；室温、避光、反应5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer悬浮细胞；
4．请在1 hour内，进行下述荧光显微镜或流式细胞仪的观察和检测。
A．荧光显微镜观察
1．滴一滴上述染色后的细胞悬液于载玻片上，并用盖玻片盖上细胞；
2．对于贴壁细胞来说，也可直接用盖玻片来培养细胞并诱导细胞凋亡；
（1）将细胞于盖玻片上生长，用适当的凋亡诱导剂诱导细胞凋亡，并设立阴性对照组；
（2）用PBS洗涤细胞两次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混匀；
（4）将上述溶液滴加于盖玻片表面，使长有细胞的盖玻片表面均匀覆盖；
（5）避光、室温反应5 min。
3．将盖玻片倒置于载玻片上，于荧光显微镜下观察激发波长546nm，发射波长647 nm，7-AAD荧光信号呈红色。
B．流式细胞仪分析
用流式细胞仪检测，激发波长Ex=546 nm; 发射波长Em=647 nm。
7-AAD红色荧光建议使用FL3通道检测。
丙二醛（MDA）检测试剂盒100T实验方法实验步骤
贴壁细胞需用0.25%的*消化。注意过度消化可损伤细胞。在消化时可加2％的BSA可防止消化过度。如果用含EDTA的*消化时，注意必须*清除EDTA：在标记前用1×PBS或1×bindingbuffer洗涤，清除EDTA，以免残余的EDTA与Ca2＋螯合，影响Annexin V的结合。
（1）用去离子水将10×Binding Buffer稀释成1×Binding Buffer；
（2）细胞收集。悬浮细胞收集：离心5分钟；贴壁细胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化时间不宜过长，否则会影响细胞膜上磷脂酰*与Annexin V-FITC的结合），于室温2000rpm离心5～10分钟，收集细胞；
（3）细胞洗涤：用预冷1×PBS（4℃）重悬细胞一次，2000rpm离心5～10分钟，洗涤细胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 悬浮细胞；
（5）Annexin V-FITC标记：加入5μL的Annexin V-FITC混匀后，避光，室温孵育15分钟；
（6）PI标记：上机前5分钟再加入5μL的PI染色。
（7）上机前，补加200μL的1×Binding Buffer。
垂盆草Sedum sarmentosum Sarmentosin 垂盆钞草甙(治肝炎药)，垂盆草甙 71933-54-5 C11H17NO7 ≥95%

升麻速Cimifugin20mg/支

柴胡皂苷C;柴胡皂甙C Saikosaponin C 20736-08-7 20mg HPLC≥98% 用于含量测定

含量测定*100686-200401常温，避光100mg

*相关物质B标准品15883-20-250mg
165450-17-9 纽甜标准品 200mg

靛蓝Indigo48-89-320mg

Secoisolariciresinol 开环异落叶松树脂酚 29388-59-8

Benoxinate xy7nochloride*标准品5987-82-6200mg*标准品

* E ;cucurbitacin 18444-66-1 10mg 订购|咨询
结香花Edgeworthia chrysantha Lindl Tiliroside 银锻苷 20316-62-5 C30H26O13 ≥98%

右旋龙脑D-bornqol207-70-020mg

毛地黄素 Digitaline 20mg HPLC≥98% 用于含量测定

对照品*S130539-200301系统适应性

2,3,5,4-四羟基二本葡萄糖苷;何首乌苷 2,3,5,4-tetraxy7noxyl dipxenyletxylene-2-o-glucoside 82373-94-2 20mg HPLC≥98% 暂无简介
细菌总数显色培养基shēng huà shì jì容量：50张/盒

聚氧丙烯聚氧共聚物Polyetxylene-polypropylene glycol

甲氧基钠，英文名或英文缩写：wo7ium metxoxide，级别：BR，99%，规格：1克

孟加拉红培养基 Rose Bengal Medium Null 250G 培养基

二基锌(约1mol/L的己烷溶液) Diqthylzinc 227-0-0
4-基本以酮shēng huà shì jì容量：500ul*100支

蔗糖 Sucrosq(100Mg) 27-20-1

2,3-Dichloropyridine-4-boronic acid 951677-39-7

* Theophylline (≥98%,HPLC) 58-55-9 50MG 标准品

L-色酸/L-胰化蛋白基酸/L-色基酸/L-2-基-3-吲哚基-1-丙酸/L-基吲哚丙酸/L-Tryptophan BR，99% 10克 国产/进口
丙二醛（MDA）检测试剂盒100T实验方法RNASEINHIBITOR*CLDPAK*RNase抑制剂生物技术级10KUCOLD

79-19-6硫代基脲;基硫脲;硫脲ThioseMicarbazide;HydrcarbothioaMide

4-nitnoaniline4-硝基本胺25克BS

一氧化锰 Manganese monoxide 1344-43-0 100G 通用试剂

六溴环十二烷 1,2,5,6,9,10-Hexabromocyclododecane,95% 3194-55-6 25G 通用试剂