SYBR Green II 核酸染料100 μL保存 返回列表页

SYBR Green II 核酸染料100 μL保存产品及特点:
尿素-聚丙烯酰胺凝胶电泳(Urea PAGE)是目前分离 200 nt 以下的小片段 RNA，尤其是 20 nt 左右的 microRNA(miRNA)分子的主要方法，但是单独 配制各种溶液十分繁琐，为此天泽基因开发了本产品。它具有下列特点: 1. 一站式，含有电泳所需要的所有试剂，即开即用，十分方便，免去了 实验人员称取有毒物品。 2. 灵活，可以根据需要配制各种浓度的 Urea-PAGE，以便对长度各异 的 RNA 进行电泳。 3. 电泳后可直接用于 UV 观察、银染、胶回收、Northern 杂交和放射自 显影等。 4. 使用新型缓冲液，可以防止甘油的干扰。
SYBR Green II 核酸染料100 μL保存使用方法：
一、准备工作
1. 用固相 RNase 清除剂清洁工作的台面和器皿（详见该产品的使用手册）。
2. 配制 1 X 电泳缓冲液 将适量的 10X 电泳缓冲液用 RNase-free 水稀释 10 倍，得到 1X 电泳缓 冲液待用。
3. 配制 10%过硫酸铵溶液 精确称取约 100 mg 过硫酸铵到一干净的 1.5 mL 离心管中，按每 1 mg 过硫酸铵加 10 uL RNase-free 水的比例加入 RNase-free 水，摇晃致溶， 立即使用。注意：放置时间不要超过一周。
二、配制凝胶
1. 估计所需要的凝胶溶液的体积，一般配制一块 13 cm X 15 cm X 0.8 mm 的胶需要 15 mL 凝胶溶液，配制一块 36 cm X 45 cm X 0.8 mm 的胶 需要 120 mL 凝胶溶液。
2. 新鲜的 40%的丙烯酰胺-甲叉双丙烯酰胺溶液的配制：在装有 60g 丙烯酰 胺干粉的瓶中加入约 130 mL 自备的去离子水，然后将全部甲叉双丙烯酰 胺加入到同一塑料瓶中（可以加少量丙烯酰胺溶液冲洗出来以避免粉末有 毒粉末飘出。甲叉双丙烯酰胺溶解度低，不会溶解在这少量溶液中）。充 分摇晃混匀后所得溶液即 40%的 Acrylamide/Bis 溶液。配制 40%而非 30%的原因是这样可以在下步留出足够空间加尿素。
3. 根据所需要的凝胶溶液的体积，在一的干净的三角瓶中按下表加入各成分
4. 搅拌并加热到 40-50℃左右，直到尿素*溶解。
5. 冷却到室温后，将三角瓶接上真空系统抽真空处理 10-15 分钟以充分去 除溶液中的氧气（氧气会降低聚合反应效率）。但如果实验条件有限，此 步也可以省略。
6. 边摇晃溶液变加入 50 uL TEMED 和 500 uL 10%过硫酸铵。注意：即 使选择其他工作浓度的 Acrylamide/Bis，TEMED 和 10%过硫酸铵的用 量也不需要随之改变。但如果配置的凝胶溶液的体积变化，TEMED 和 10%过硫酸铵的用量也要按比例改变。
7. 再充分摇晃约 30 秒后迅速灌胶，然后插入样品梳。
8. 室温放置 30-60 分钟使胶凝固。
9. 将凝胶板放置在电泳装置上后，在上下层分别加入适当量的 1X 电泳缓冲 液。如果不马上使用，需要有湿纸将上样孔端盖住以防凝胶过度干燥。
10. 拔出梳子后用加样枪吸取电泳缓冲液，充分将每个加样空中未聚合的 Acrylamide/Bis、尿素和气泡吹打出来。
SYBR Green II 核酸染料100 μL保存后续处理：
1. 染色观察：将凝胶一面的玻璃板揭开，直接用仍然附着在另一玻璃板上的 凝胶进行各种染色，包括银染（固定、漂洗、显影和定影等步骤）、EB（每 100 mL 1×TBE 中加 20 uL 10mg/mL 的 EB 溶液）、天泽基因低毒核 酸染料 DNAgreen（每 100 mL 1×TBE 中加 10 uL DNAgreen 原液）。 UV 下观察并拍照。
2. miRNA 回收：按上法用 EB 等染料染色后，UV 下确定所需要的 miRNA 条带的位置，切胶后进行胶回收处理。
3. Northern 杂交：按上法用 EB 等染料染色后，UV 下确定所需要的 miRNA 条带的位置，切胶后电转移到带正电的尼龙膜上，然后进行杂交处理。
4. 放射自显影：如果 miRNA 样品电泳前经过同位素标记，则将凝胶一面的 玻璃板揭开，用滤纸将附着在另一玻璃板上的凝胶吸附过来，然后包上保 鲜膜，真空抽干，然后使胶跟 X 光片向对置进行放射自显影。
tTA基因修饰的小鼠畸胎瘤细胞(B类);F9-CAG-tTA-3A1

HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Hubei/2011) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人细胞裂解液 (阳性对照)

Lewis瘤 肺癌

JAR人胎盘绒毛癌细胞 Human placental villous carcinoma cells JAR DMEM+10%FBS

GREM1 Protein Mouse 重组小鼠 Gremlin 1 / GREM1 蛋白 (His 标签)

人正常来源细胞 PC-12(高分化)，PC12，大鼠肾上腺髓质嗜铬瘤分化细胞株(高分化) Rattus
EREG Others Mouse 小鼠 EREG / epiregulin 人细胞裂解液 (阳性对照)

人滑膜细胞总RNAHS tRNA

MDA-MB-231 人癌细胞

CL-0369IR983F(大鼠骨髓瘤细胞)5×106cells/瓶×2

CSC, 小鼠心肌细胞

人胚肺二倍体细胞;HEL-1 人胃粘膜上皮细胞*培养基 100mL
人滑膜细胞总RNAHS tRNA

EREG Others Mouse 小鼠 EREG / epiregulin 人细胞裂解液 (阳性对照)

MDA-MB-231 人癌细胞

CL-0369IR983F(大鼠骨髓瘤细胞)5×106cells/瓶×2

CSC, 小鼠心肌细胞

人胚肺二倍体细胞;HEL-1 人胃粘膜上皮细胞*培养基 100mL
ets1/E26 (E-twenty six 1) Ets转录因子家族ets1抗原Multi-class antibodies规格： 0.5mg

Bax(小鼠来源抗体) Anti-Bax 0.1ml

Rhesus antibody Rh phospho-EGFR (Ser768) 磷酸化表皮生长因子受体抗体 规格 0.1ml

F12培养基 (Ham) 10×1L Gibco

ZNF131 英文名称： 锌指蛋白131抗体 0.2ml

GP340 英文名称： 抑癌基因抗体 0.1ml

Bax(小鼠来源抗体) Anti-Bax 0.1ml
Rabbit Anti-horse IgM/Cy7 Cy7标记的兔抗马IgM 0.1ml

FAM29A 英文名称： FAM29蛋白抗体 0.2ml

软骨糖蛋白39抗体 Anti-CDR/YKL-40 0.1ml

Anti-ompF/FITC 荧光素标记小肠结肠炎耶尔森氏菌膜通道蛋白抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh PLAGL1/ZAC1 多型性腺瘤基因样蛋白1抗体 规格 0.2ml

Rabbit Anti-human IgA/HRP 辣根过氧化物酶标记兔抗人IgAMulti-class antibodies规格： 0.1ml
SYBR Green II 核酸染料100 μL保存IL-19 大鼠白介素-19Multi-class antibodies规格： 48T

Anti-Defensin Beta 2/DEFB2 防御素β2抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh NDUFV2 NADH脱氢酶黄素蛋白2抗体 规格 0.1ml

Human Plaet Factor 4,PF-4 ELISA Kit 人血小板因子4 96T

SPG21 英文名称： 痉挛性截瘫相关蛋白21抗体 0.2ml

C22orf23 英文名称： 22号染色体开放阅读框23抗体 0.2ml

Anti-Defensin Beta 2/DEFB2 防御素β2抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml