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电泳级过硫酸铵0.1gx10运输

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更新时间:2017-07-14 13:28:59浏览次数:161次

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电泳级过硫酸铵0.1gx10运输使用方法 一、准备工作 1. 用固相 RNase 清除剂清洁工作的台面和器皿(详见该产品的使用手册)。 2. 配制 1 X 电泳缓冲液 将适量的 10X 电泳缓冲液用 RNase-free 水稀释 10 倍,得到 1X 电泳缓冲液待用。

电泳级过硫酸铵0.1gx10运输详细介绍:

电泳级过硫酸铵0.1gx10运输产品及特点:
尿素-聚丙烯酰胺凝胶电泳(Urea PAGE)是目前分离 200 nt 以下的小片段 RNA,尤其是 20 nt 左右的 microRNA(miRNA)分子的主要方法,但是单独 配制各种溶液十分繁琐,为此天泽基因开发了本产品。它具有下列特点: 1. 一站式,含有电泳所需要的所有试剂,即开即用,十分方便,免去了 实验人员称取有毒物品。 2. 灵活,可以根据需要配制各种浓度的 Urea-PAGE,以便对长度各异 RNA 进行电泳。 3. 电泳后可直接用于 UV 观察、银染、胶回收、Northern 杂交和放射自 显影等。 4. 使用新型缓冲液,可以防止甘油的干扰。
电泳级过硫酸铵0.1gx10运输使用方法:
一、准备工作
1. 用固相 RNase 清除剂清洁工作的台面和器皿(详见该产品的使用手册)。
2. 配制 1 X 电泳缓冲液 将适量的 10X 电泳缓冲液用 RNase-free 水稀释 10 倍,得到 1X 电泳缓 冲液待用。
3. 配制 10%过硫酸铵溶液 精确称取约 100 mg 过硫酸铵到一干净的 1.5 mL 离心管中,按每 1 mg 过硫酸铵加 10 uL RNase-free 水的比例加入 RNase-free 水,摇晃致溶, 立即使用。注意:放置时间不要超过一周。
二、配制凝胶
1. 估计所需要的凝胶溶液的体积,一般配制一块 13 cm X 15 cm X 0.8 mm 的胶需要 15 mL 凝胶溶液,配制一块 36 cm X 45 cm X 0.8 mm 的胶 需要 120 mL 凝胶溶液。
2. 新鲜的 40%的丙烯酰胺-甲叉双丙烯酰胺溶液的配制:在装有 60g 丙烯酰 胺干粉的瓶中加入约 130 mL 自备的去离子水,然后将全部甲叉双丙烯酰 胺加入到同一塑料瓶中(可以加少量丙烯酰胺溶液冲洗出来以避免粉末有 毒粉末飘出。甲叉双丙烯酰胺溶解度低,不会溶解在这少量溶液中)。充 分摇晃混匀后所得溶液即 40% Acrylamide/Bis 溶液。配制 40%而非 30%的原因是这样可以在下步留出足够空间加尿素。
3. 根据所需要的凝胶溶液的体积,在一的干净的三角瓶中按下表加入各成分
4. 搅拌并加热到 40-50左右,直到尿素*溶解。
5. 冷却到室温后,将三角瓶接上真空系统抽真空处理 10-15 分钟以充分去 除溶液中的氧气(氧气会降低聚合反应效率)。但如果实验条件有限,此 步也可以省略。
6. 边摇晃溶液变加入 50 uL TEMED 500 uL 10%过硫酸铵。注意:即 使选择其他工作浓度的 Acrylamide/BisTEMED 10%过硫酸铵的用 量也不需要随之改变。但如果配置的凝胶溶液的体积变化,TEMED 10%过硫酸铵的用量也要按比例改变。
7. 再充分摇晃约 30 秒后迅速灌胶,然后插入样品梳。
8. 室温放置 30-60 分钟使胶凝固。
9. 将凝胶板放置在电泳装置上后,在上下层分别加入适当量的 1X 电泳缓冲 液。如果不马上使用,需要有湿纸将上样孔端盖住以防凝胶过度干燥。
10. 拔出梳子后用加样枪吸取电泳缓冲液,充分将每个加样空中未聚合的 Acrylamide/Bis、尿素和气泡吹打出来。
电泳级过硫酸铵0.1gx10运输后续处理:
1. 染色观察:将凝胶一面的玻璃板揭开,直接用仍然附着在另一玻璃板上的 凝胶进行各种染色,包括银染(固定、漂洗、显影和定影等步骤)、EB(每 100 mL 1×TBE 中加 20 uL 10mg/mL EB 溶液)、天泽基因低毒核 酸染料 DNAgreen(每 100 mL 1×TBE 中加 10 uL DNAgreen 原液)。 UV 下观察并拍照。
2. miRNA 回收:按上法用 EB 等染料染色后,UV 下确定所需要的 miRNA 条带的位置,切胶后进行胶回收处理。
3. Northern 杂交:按上法用 EB 等染料染色后,UV 下确定所需要的 miRNA 条带的位置,切胶后电转移到带正电的尼龙膜上,然后进行杂交处理。
4. 放射自显影:如果 miRNA 样品电泳前经过同位素标记,则将凝胶一面的 玻璃板揭开,用滤纸将附着在另一玻璃板上的凝胶吸附过来,然后包上保 鲜膜,真空抽干,然后使胶跟 X 光片向对置进行放射自显影。
lovo, 人结肠癌细胞

GAD2 Others Mouse 小鼠 GAD65 / GAD2 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)

人原胚肾转化细胞;293 Ad5

Jurkat,Clone E6-1细胞,T淋巴细胞白血病细胞 人鼻咽癌细胞系,SUNE-1亚株13-9B细胞 CL-0346HBE(人支气管上皮样细胞)5×106cells/瓶×2

中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO-beta2(414) CL.32 pTGF-beta2(414)

LDLR Others Human LDLR / LDL Receptor 人细胞裂解液 (阳性对照)
S100B Others Mouse 小鼠 S100B / S100beta 人细胞裂解液 (阳性对照)

人毛细胞cDNAHHDPC cDNA

人成骨细胞*培养基 100mL

BHK-21细胞,叙利亚仓鼠肾细胞 JAR(胚绒毛癌细胞) APP-PS1双基因转染CHO细胞株;7WPS1

EFNA5 Protein Rat 重组大鼠 Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白 (Fc 标签)

A875(人黑色素瘤细胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠肾集合管细胞(SV40转化);M-1
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BHK-21细胞,叙利亚仓鼠肾细胞 JAR(胚绒毛癌细胞) APP-PS1双基因转染CHO细胞株;7WPS1

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A875(人黑色素瘤细胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠肾集合管细胞(SV40转化);M-1
TFR/CD71 ELISA Kit 大鼠转铁蛋白受体Multi-class antibodies规格: 48T

Anti-XIAP X-连锁凋亡蛋白/性连锁凋亡抑制蛋白抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml

Rhesus antibody Rh G protein alpha S G蛋白αS抗体(*核苷酸结合蛋白Gα s) 规格 0.2ml

LN(Mouse Laminin) ELISA Kit 小鼠层连蛋白/板层素 96T

NEGR1 英文名称: 神经生长调节蛋白1抗体 0.2ml

phospho-AQP2 (Ser256) 英文名称: 磷酸化水通道蛋白2抗体 0.1ml

Anti-XIAP X-连锁凋亡蛋白/性连锁凋亡抑制蛋白抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml
Goat Anti-Chicken IgG/APC APC标记的羊抗鸡IgG 0.1ml

Fibronectin 英文名称: 纤维连接蛋白抗体 0.1ml

钙激活钾通道蛋白抗体 Anti-BKCa channels 0.1ml

Anti-NKG2C/FITC 荧光素标记NK细胞受体2C/自然杀伤细胞活化性受体2C抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh PPIA/Cyclophilin A 亲环蛋白(亲环素)PPIA抗体 规格 0.1ml

Anti-HAS/RBITC 红色罗丹明标记人血清白蛋白抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
电泳级过硫酸铵0.1gx10运输IFN- Alpha/ BetaR(Human Interferon Alpha/ BetaReceptor) ELISA Kit 人α/β干扰素受体Multi-class antibodies规格: 48T

Anti-Phospho-Gab1 (Tyr659) 磷酸化接头蛋白Gab 1抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml

Rhesus antibody Rh Mouse Anti-human IgG/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5标记的小鼠抗人IgG 规格 0.1ml

OTF2A(Human octamer transcription factor 2A) ELISA Kit 人八聚体转录因子 96T

SLC12A6 英文名称: 钾氯离子转运蛋白3抗体 0.2ml

CSFV Envelope glycoprotein E2 英文名称: 猪瘟病毒包膜糖蛋白E2抗体 0.1ml

Anti-Phospho-Gab1 (Tyr659) 磷酸化接头蛋白Gab 1抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml

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