电泳级 MOPS100g* 返回列表页

电泳级 MOPS100g*产品及特点:
尿素-聚丙烯酰胺凝胶电泳(Urea PAGE)是目前分离 200 nt 以下的小片段 RNA，尤其是 20 nt 左右的 microRNA(miRNA)分子的主要方法，但是单独 配制各种溶液十分繁琐，为此天泽基因开发了本产品。它具有下列特点: 1. 一站式，含有电泳所需要的所有试剂，即开即用，十分方便，免去了 实验人员称取有毒物品。 2. 灵活，可以根据需要配制各种浓度的 Urea-PAGE，以便对长度各异 的 RNA 进行电泳。 3. 电泳后可直接用于 UV 观察、银染、胶回收、Northern 杂交和放射自 显影等。 4. 使用新型缓冲液，可以防止甘油的干扰。
电泳级 MOPS100g*详细介绍：

电泳级 MOPS100g*使用方法：
一、准备工作
1. 用固相 RNase 清除剂清洁工作的台面和器皿（详见该产品的使用手册）。
2. 配制 1 X 电泳缓冲液 将适量的 10X 电泳缓冲液用 RNase-free 水稀释 10 倍，得到 1X 电泳缓 冲液待用。
3. 配制 10%过硫酸铵溶液 精确称取约 100 mg 过硫酸铵到一干净的 1.5 mL 离心管中，按每 1 mg 过硫酸铵加 10 uL RNase-free 水的比例加入 RNase-free 水，摇晃致溶， 立即使用。注意：放置时间不要超过一周。
二、配制凝胶
1. 估计所需要的凝胶溶液的体积，一般配制一块 13 cm X 15 cm X 0.8 mm 的胶需要 15 mL 凝胶溶液，配制一块 36 cm X 45 cm X 0.8 mm 的胶 需要 120 mL 凝胶溶液。
2. 新鲜的 40%的丙烯酰胺-甲叉双丙烯酰胺溶液的配制：在装有 60g 丙烯酰 胺干粉的瓶中加入约 130 mL 自备的去离子水，然后将全部甲叉双丙烯酰 胺加入到同一塑料瓶中（可以加少量丙烯酰胺溶液冲洗出来以避免粉末有 毒粉末飘出。甲叉双丙烯酰胺溶解度低，不会溶解在这少量溶液中）。充 分摇晃混匀后所得溶液即 40%的 Acrylamide/Bis 溶液。配制 40%而非 30%的原因是这样可以在下步留出足够空间加尿素。
3. 根据所需要的凝胶溶液的体积，在一的干净的三角瓶中按下表加入各成分
4. 搅拌并加热到 40-50℃左右，直到尿素*溶解。
5. 冷却到室温后，将三角瓶接上真空系统抽真空处理 10-15 分钟以充分去 除溶液中的氧气（氧气会降低聚合反应效率）。但如果实验条件有限，此 步也可以省略。
6. 边摇晃溶液变加入 50 uL TEMED 和 500 uL 10%过硫酸铵。注意：即 使选择其他工作浓度的 Acrylamide/Bis，TEMED 和 10%过硫酸铵的用 量也不需要随之改变。但如果配置的凝胶溶液的体积变化，TEMED 和 10%过硫酸铵的用量也要按比例改变。
7. 再充分摇晃约 30 秒后迅速灌胶，然后插入样品梳。
8. 室温放置 30-60 分钟使胶凝固。
9. 将凝胶板放置在电泳装置上后，在上下层分别加入适当量的 1X 电泳缓冲 液。如果不马上使用，需要有湿纸将上样孔端盖住以防凝胶过度干燥。
10. 拔出梳子后用加样枪吸取电泳缓冲液，充分将每个加样空中未聚合的 Acrylamide/Bis、尿素和气泡吹打出来。
电泳级 MOPS100g*后续处理：
1. 染色观察：将凝胶一面的玻璃板揭开，直接用仍然附着在另一玻璃板上的 凝胶进行各种染色，包括银染（固定、漂洗、显影和定影等步骤）、EB（每 100 mL 1×TBE 中加 20 uL 10mg/mL 的 EB 溶液）、天泽基因低毒核 酸染料 DNAgreen（每 100 mL 1×TBE 中加 10 uL DNAgreen 原液）。 UV 下观察并拍照。
2. miRNA 回收：按上法用 EB 等染料染色后，UV 下确定所需要的 miRNA 条带的位置，切胶后进行胶回收处理。
3. Northern 杂交：按上法用 EB 等染料染色后，UV 下确定所需要的 miRNA 条带的位置，切胶后电转移到带正电的尼龙膜上，然后进行杂交处理。
4. 放射自显影：如果 miRNA 样品电泳前经过同位素标记，则将凝胶一面的 玻璃板揭开，用滤纸将附着在另一玻璃板上的凝胶吸附过来，然后包上保 鲜膜，真空抽干，然后使胶跟 X 光片向对置进行放射自显影。
CL-0178OVCAR-3(人卵巢癌细胞)5×106cells/瓶×2

FZD5 Others Mouse 小鼠 Frizzled-5 / FZD5 CHO细胞裂解液 (阳性对照)

人前脂肪细胞-皮下裂解物HPA-s L

小耳猪肺细胞;SEP-L1 癌细胞，MDA-MB-435S细胞 MA891细胞，小鼠癌细胞

人EB病毒转化的B细胞;CGM1

HA Others H2N2 甲型流感 H2N2 (A/Canada/720/2005) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人细胞裂解液 (阳性对照)
ACLY Others Human 人 ACLY / acly / ATP citrate lyase 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)

人毛细胞RNAHHDPC miRNA5 μg

大耳山羊肾细胞;LDG-2

SK-N-MC细胞，神经上皮瘤细胞 鼠骨髓瘤细胞,P3/NS1/1-Ag4-1细胞 人胃腺癌细胞;SGC-7901 [SGC7901]

小鼠Lewis肺癌瘤株;LLT

IL13RA2 Others Mouse 小鼠 IL13RA2 / CD213A2 人细胞裂解液 (阳性对照)
人毛细胞RNAHHDPC miRNA5 μg

ACLY Others Human 人 ACLY / acly / ATP citrate lyase 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)

大耳山羊肾细胞;LDG-2

SK-N-MC细胞，神经上皮瘤细胞 鼠骨髓瘤细胞,P3/NS1/1-Ag4-1细胞 人胃腺癌细胞;SGC-7901 [SGC7901]

小鼠Lewis肺癌瘤株;LLT

IL13RA2 Others Mouse 小鼠 IL13RA2 / CD213A2 人细胞裂解液 (阳性对照)
AChRab ELISA Kit 大鼠乙酰*受体抗体Multi-class antibodies规格： 48T

Anti-XBP-1 细胞核转录因子X盒结合蛋白抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh G alpha gust Gα gust抗体 规格 0.2ml

IGF-1(Human insulin-like growth factors 1) ELISA Kit 人胰岛素样生长因子1 96T

NF-ATc4 英文名称： T细胞激活核转录因子4抗体 0.1ml

APPBP1 英文名称： β淀粉样蛋白前体蛋白结合蛋白1抗体 0.2ml

Anti-XBP-1 细胞核转录因子X盒结合蛋白抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml
Goat Anti-Chicken IgG/RBITC 罗丹明标记的羊抗鸡IgG 0.3ml

phospho-FABP4 (Tyr20) 英文名称： 磷酸化脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白 0.1ml

细胞凋亡抑制因子5抗体 Anti-BIRC5/Survivin variant 0.1ml

Anti-NKB/FITC 荧光素标记神经激肽 B抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh PPIG 亲环蛋白(亲环素)PPIG抗体 规格 0.2ml

Anti-Il-7R a(CD127)/RBITC 罗丹明标记白细胞介素-7受体a抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml
电泳级 MOPS100g*PDGF-AB 大鼠血小板衍生生长因子Multi-class antibodies规格： 48T

Anti-Phospho-EGFR(Ser1046/1047) 磷酸化表皮生长因子受体抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh Myoglobin 肌红蛋白抗体 规格 0.1ml

HB- Beta(Human Beta-subunits of hemoglobin) ELISA Kit 人血红蛋白β亚基 96T

SLC10A1 英文名称： 钠离子/磺胆酸共转运蛋白抗体 0.1ml

(C2F1) 英文名称： 单克隆抗体 0.1ml

Anti-Phospho-EGFR(Ser1046/1047) 磷酸化表皮生长因子受体抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml