当前位置:上海莼试生物技术有限公司>>RNA/DNA提取>>探针标记及检测产品>> TMB 法*杂交试剂盒5次说明书
TMB 法*杂交试剂盒5次说明书步骤:
1. 如果标记的探针是双链核酸,则需经变性处理。具体操作是:根据探针浓 度和杂交所需探针的量计算出所需的探针体积,取出所需体积的探针到一 干净的硅化的塑料离心管中,加入等体积的本产品,吹打混匀后室温放置 5 分钟变性后,将探针样品放入冰浴中冷却,加入 0.05 倍体积的自备的 1 M 的 Tris-Cl 溶液(pH 7.2)以及等体积的自备的 0.4 M 的 HCl 溶液。 将探针样品保存在冰浴中直至需要。如果是单链 DNA 或 RNA 探针,则 不需变性,直接使用。
2. 将单链探针或变性后的双链探针加入到完成了预杂交的杂交袋中(先用剪 刀剪一小口,加入探针后用热封机封口)。探针的加入量视探针标记效率 而定,一般要求终浓度不能低于 1-2 ng/mL。如果检测基因组中的单拷 贝基因,探针的加入量应加大,而对于检测克隆的基因片段,则探针的量 可减少。如果是放射性探针,应将此塑料袋套在另一塑料袋之中,以避免 杂交袋发生遗漏、污染工作环境。
3. 在选定的杂交温度下继续保温,时间一般为 6-12 小时。 六、洗膜步骤。注意在下面的所有操作过程中,一定不要使印迹。
TMB 法*杂交试剂盒5次说明书使用方法:
一、交换反应 1. 实验前需自备的试剂:7 M 醋酸铵、乙醇、70%乙醇等
2. 在微量离心管中制备下列反应液.
3. 37℃反应 30 分钟。
4. 70℃加热 5~10 分钟使酶失活。
5. 加入 10 μL 的 7 M CH3COONH4(pH 4.5)。如使用 CH3COONa 做 乙醇沉淀时使其终浓度达 300 mM。
6. 加入 87.5 μL(2.5 倍)的冷无水乙醇,-20℃放置 30~60 分钟。
7. 离心回收沉淀,用 70%的冷乙醇清洗沉淀,真空干燥。
8. 用适当 Buffer 溶解沉淀。 注:通过第 5~8 步操作几乎可以除去大部分未反应的[γ-32P] ATP,如要 *将其除去时,乙醇沉淀后用凝胶过滤等方法精制即可。如需用*抽 提除去蛋白质时,请在第 8 步之后进行。
TMB 法*杂交试剂盒5次说明书确定洗膜温度:
一般使用 0.1×SSC 做洗膜液,在此条件下的洗膜温度比 Tm 低 5-12℃,一般情况下可以在 55℃进行洗膜。Oligo 探针可以室温洗膜。 四、预杂交步骤 预杂交就是用不含探针的超级杂交液跟印迹膜进行孵育,其目的是用所含 的非特异性 DNA 分子(鲑精 DNA 或小牛胸腺 DNA)及其它高分子化合物将印 迹膜上会非特异地吸附探针分子的位点封闭,否则这些位点会吸附标记的探 针,造成高背景。
1. 将结合了靶分子的硝酸纤维素印迹膜或尼龙印迹膜浸泡于自备的 6× SSC 溶液中,使其充分湿润。
2. 将湿润的印迹膜置于一塑料杂交袋中(塑料袋预先封口,再剪掉一角, 留一个小口),按每平方厘米印迹膜加 0.2 mL 超级杂交液的比例沿小口 加入超级杂交液,然后用塑料封口机将口封牢。 3. 将此塑料袋浸没入温度设定在杂交温度的恒温水浴中或杂交炉中,保 温 1-2 小时,延长到 12-16 小时亦可。注意保温过程中塑料袋应在不停 的摇动状态中,使超级杂交液与印迹膜充分接触。
大鼠硬脂酰辅酶A去饱和酶1(SCD-1)ELISA试剂盒 ,英文名: SCD-1 ELISA Kit
人表面膜免疫球蛋白A(mIgA)ELISA检测试剂盒HumanmembraneIgA,mIgAELISAKit 96T/48T
大鼠白介素12(IL-12/P70)免疫试剂盒 Rat Interleukin 12,IL-12/P70 ELISA KIT
CLIAKitforTAISAKit大鼠*抗*复合物规格:48T/96T
人体Interleukin-4-receptoralphaRFLP基因分析试剂盒20次
ELISAKitAnuA-IgG人抗核小体抗体IgG规格:48T/96T
大鼠转甲状腺素蛋白(TTR)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人血红蛋白β亚基(HB-β)免疫试剂盒 Human HB-β ELISA Kit
人抗核膜糖蛋白210抗体(gp210)ELISA试剂盒 ,英文名: gp210 ELISA Kit
RatInterleukin1,IL-1ELISA试剂盒大鼠白介素1(IL-1)ELISA试剂盒规格:96T/48T
Humanglialfibrillaryacidicprotein,GFAPELISA试剂盒人神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)ELISA试剂盒规格:96T/48T
HumanInterleukin1β,IL-1βELISAKit人白介素1β(IL-1β)ELISA试剂盒规格:96T/48T
小鼠高灵敏度促甲状腺激素(U-TSH)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
People of transfusion transmitted virus / symplectic type hepatitis virus ((TTV) ELISA Kit 人输血传播病毒/辛型肝炎病毒((TTV)ELISA试剂盒
HumanplaetantibodiesIgG/M/A,PA-IgG/M/AELISAKit 人抗血小板抗体IgG/M/A(PA-IgG/M/A)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
Humananti-Thyroid-Peroxidaseantibody,TPO-AbELISA试剂盒人抗甲状腺过氧化物酶抗体(TPO-Ab)ELISA试剂盒规格:96T/48T
植物氧化型*(GSSG)浓度比色法定量检测试剂盒50次
Humantransforminggrowthfactorsβ2,TGFβ2ELISAKit人转化生长因子β2(TGFβ2)ELISA试剂盒规格:96T/48T
9-OxoODE (50 ug) 9-oxo-10E,12Z-octadecadienoic acid; 9-KODE; 9-OxoODE
PF-04620110 (5 mg) trans-4-[4-(4-amino-7,8-dixy7no-5-oxopyrimido[5,4-f][1,4]oxazepin-6(5H)-yl)pxenyl]-cyclohexaneacetic acid
Rhod-FF, AM Rhod-FF, AM
Palmiaidic Acid (50 mg) (9E)-hexadecenoic acid; 9-trans-Hexadecenoic acid; Palmiaidic Acid
Dihomo-γ-Linolenic Acid (500 mg) 8Z,11Z,14Z-eicosatrienoic acid; DGLA; Dihomo-γ-Linolenic Acid
Benzylpenicillin wo7ium salt Penicillin G wo7ium
Growth Hormone Releasing Factor, GRF (1-44), amide, bovineTyr-Ala-Asp-Ala-Ile-Phe-Thr-Asn-Ser-Tyr-Arg-Lys-Val-Leu-Gly-Gln-Leu-Ser-Ala-Arg-Lys-Leu-Leu-Gln-Asp-Ile-Met-Asn-Arg-Gln-Gln-Gly-Glu-Arg-Asn-Gln-Glu-Gln-Gly-Ala-Lys-Val-Arg-Leu-NH2
β- Amyloid (1-16)Asp-Ala-Glu-Phe-Arg-His-Asp-Ser-Gly-Tyr-Glu-Val-His-His-Gln-Lys
[Phe2,Orn8]-OxytocinCys-Phe-Ile-Gln-Asn-Cys-Pro-Orn-Gly- NH2 (Disulfide bridge:Cys1-Cys6)
Biotin-β-Endomorphin, humanBiotin-Tyr-Gly-Gly-Phe-Met-Thr-Ser-Glu-Lys-Ser-Gln-Thr-Pro-Leu-Val-Thr-Leu-Phe-Lys-Asn-Ala-Ile-Ile-Lys-Asn-Ala-Tyr-Lys-Lys-Gly-Glu
PACAP-Related Peptide (1-29) (rat)Asp-Val-Ala-His-Glu-Ile-Leu-Asn-Glu-Ala-Tyr-Arg-Lys-Val-Leu-Asp-Gln-Leu-Ser-Ala-Arg-Lys-Tyr-Leu-Gln-Ser-Met-Val-Ala
TMB 法*杂交试剂盒5次说明书溴代本BromobenzeneAR500mL
MD34-14透析袋(半周长34mm,直径22mm,截留分子量14000Da) 5米/卷0
HN007-200MLNewborn Calf Serum 新生牛血清--200ml
D2000 DNA Ladder250ul
Linoleic Acid10g
请输入账号
请输入密码
请输验证码
以上信息由企业自行提供,信息内容的真实性、准确性和合法性由相关企业负责,仪表网对此不承担任何保证责任。
温馨提示:为规避购买风险,建议您在购买产品前务必确认供应商资质及产品质量。