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小鼠杂交瘤细胞株;GPC3-1H5图片

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更新时间:2017-09-13 12:18:46浏览次数:232次

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小鼠杂交瘤细胞株;GPC3-1H5图片来源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等品牌),活力>95%,贴壁性好。我们从试剂、包被器皿、冻存原代细胞、新鲜原代细胞、原代细胞的分子学实验等提供全程服务。我司拥有专业的实验室,可无菌操作并提供相关科研项目解决方案以及实验服务。

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产品名称

生长特性

货期

小鼠杂交瘤细胞株;GPC3-1H5图片

悬浮生长

35

细胞名称  小鼠杂交瘤细胞株;GPC3-1H5图片
形态特性   淋巴母细胞样
生长特性   悬浮生长
特征特性    该细胞属保藏,其特征特性尚未公开。
培养条件   MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
传代方法   1:3传代,3-4天传1
传代情况  C5
冻存条件  基础培养基+5%DMSO+20%FBS 
支原体检测  阴性 
STR   
同工酶

染色体

使用权限 未定
小鼠杂交瘤细胞株;GPC3-1H5图片冻保存方法一:冷冻管置于4300分钟→(-2030分钟*)→-8016~18小时(或隔夜)→液氮槽*储存。 
冷冻保存方法二:冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3–80以下,再放入液氮槽期储存。-20不可超过1小时,以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,也可跳过此步骤直接放入-80冰箱中,但存活率稍微降低一些。 
迄今为止,公司收录背景资料清晰,细胞活力状态良好的细胞株1420株,其中绝大部分是近年来从美国ATCCNIH分批引进的细胞种子,少部分来自全国各地细胞研究所,细胞来源可靠,背景资料清晰,代数年轻,活力好。冻保存方法一:冷冻管置于4300分钟→(-2030分钟*)→-8016~18小时(或隔夜)→液氮槽*储存。 
小鼠杂交瘤细胞株;GPC3-1H5图片复苏操作要点:
1)将培养基在37水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。
2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内*解冻,使细胞能尽快通过易受损的温度段(-5~0)。注意冻存管管口不能没入水中,BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。
4800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。
5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。
6)第二天观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代,细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
小鼠杂交瘤细胞株;GPC3-1H5图片操作步骤:
1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量*,使*的量能盖住细胞,37孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去*,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止*作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37温箱培养。
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