elisa定量检测试剂盒实验操作

elisa定量检测试剂盒实验操作
3.1 样品的稀释样品稀释是ELISA实验过程中操作影响zui大的部分之一，因为样品稀释大多是手工操作完成。 不同的检测原理使用的血清浓度有差异， 血清稀释倍数从1：1到1：200不等。阻断法一般使用的血清浓度比较高， 其次是夹心法， 间接法使用的血清浓度比较低。血清稀释首先是采用正确的稀释倍数和使用正确的样品稀释液， 另外还要注意混匀和防止不同样品质检交叉污染。如果样品量比较大可以使用稀释版进行稀释， 如果稀释倍数比较高可以采用分步稀释的方法。 避免进行长时间的孔内稀释，因为这样会造成前后样品反应时间的差异， 影响到板内的均一性。
3.2 样品或液体的添加样品或液体的添加其实就是将液体从样品管、 稀释板或加样槽中转移到包被板中。这一步操作关键是正确及规范正确使用移液器， 需要注意的是在将液体加至包被板的微孔中时避免产生气泡或将液体加在管壁上部，另外在添加液体后避免用微旋振荡器进行混匀， 此细节针对不同工艺的产品会产生不同程度的影响。
3.3 孵育孵育就是抗原抗体反应的过程。 不同的产品所设计的孵育温度有25℃、 37℃等，孵育时间有10、 15、 30、 60分钟等。 首先是要确保孵育的温度和时间正确无误，另外需要注意的是， 孵育时防止微孔板被的液体蒸发产生浓缩效果， 使整个实验本底升高，为了避免这个问题通常采用湿盒或封板膜。 另外就是需要考虑孵育时包被板内的液体受热的时间、 速度及均一度。
3.4 洗板液的主要成分是表面活性剂， 其主要的作用是洗掉没有参与反应的或非特异性结合的物质。洗板也是ELISA实验操作中影响比较大的一步，但是现在大多使用洗板机， 其认为操作带来的影响就大大减小。 如果采用手工洗板方法需要注意以下几点：洗涤液的稀释倍数及稀释所使用的溶剂， 添加洗涤液的体积， 浸泡时间和洗板次数。每一个因素都会直接影响到试剂的性能。
3.5 终止反应终止液的成份主要取决于酶及底物的成份， 常用的终止液有氢氧化钠、氟化氢或硫酸， 这些液体都具有很强的腐蚀性， 使用时要注意安全，如果溅到眼睛或皮肤需要及时处理。 在实验过程中要在正确的时间进行终止， 终止之后孔内液体的颜色相对比较稳定，但是也会缓慢的变化， 有时候孔内会缓慢产生沉淀同时孔内颜色变浅， 需要及时进行读值。
elisa定量检测试剂盒绵羊结合珠蛋白/触珠蛋白(HP)ELISA Kit    英文名：    Sheep haptoglobin,HP ELISA kit
绵羊窖蛋白Caveolin-1(CAV1)ELISA Kit    英文名：    Sheep Caveolin-1,CAV1 ELISA kit
绵羊甲状腺素(T4)ELISA Kit    英文名：    Sheep thyroxine(T4)ELISA kit
绵羊基质金属蛋白酶9/明胶酶B(MMP9/Gelatinase B)ELISA Kit    英文名：    Sheep matrix metallopeptidase 9,MMP9 ELISA kit
绵羊基质金属蛋白酶3(MMP3)ELISA Kit    英文名：    Sheep matrix metallopeptidase 3(stromelysin 1,progelatinase)(MMP3)ELISA kit
绵羊基质金属蛋白酶1(MMP1)ELISA Kit    英文名：    Sheep matrix metallopeptidase 1(interstitial collagenase)(MMP1)ELISA kit
绵羊饥饿激素(GHRL)ELISA Kit    英文名：    Sheep ghrelin/obestatin prepropeptide,GHRL ELISA kit
绵羊黄体生成素(LH)ELISA Kit    英文名：    Sheep Luteinizing Hormone,LH ELISA Kit
绵羊*(cAMP)ELISA Kit    英文名：    Sheep cyclic adenosine monophosphate,cAMP ELISA Kit
绵羊环磷酸鸟苷(cGMP)ELISA Kit    英文名：    Sheep cyclic Guanosine monophosphate,cGMP ELISA Kit
绵羊花生四烯酸(AA)ELISA Kit    英文名：    Sheep arachidonic Acid,AA ELISA kit
绵羊骨钙素/骨*蛋白(OT/BGP)ELISA Kit    英文名：    Sheep Osteocalcin/Bone gla protein,OT/BGP ELISA kit
绵羊睾酮(T)ELISA Kit    英文名：    Sheep Testosterone(T)ELISA kit
绵羊甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)ELISA Kit    英文名：    Sheep Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH ELISA kit
绵羊肺表面活性物质相关蛋白C(SP-C)ELISA Kit    英文名：    Sheep pulmonary surfactant-associated protein C,SP-C ELISA Kit
绵羊肺表面活性物质相关蛋白B(SP-B)ELISA Kit    英文名：    Sheep pulmonary surfactant-associated protein B,SP-B ELISA Kit
绵羊非酯化脂肪酸(NEFA)ELISA Kit    英文名：    Sheep non-ester fatty acid,NEFA ELISA kit
绵羊二醇受体(ER-Alpha)ELISA Kit    英文名：    Sheep Estradiol Receptor Alpha,ER-Alpha ELISA Kit
绵羊弹性蛋白酶2,中性粒细胞(ELA2)ELISA Kit    英文名：    Sheep elastase 2,neutrophil(ELA2)ELISA kit
绵羊催产素(OT)ELISA Kit    英文名：    Sheep oxytocin,OT ELISA Kit
绵羊雌二醇(E2)ELISA Kit    英文名：    Sheep Estradiol,E2 ELISA Kit
绵羊成纤维细胞生长因子23(FGF23)ELISA Kit    英文名：    Sheep Fibroblast Growth Factor 23,FGF23 ELISA Kit
绵羊补体片段3a(C3a)ELISA Kit    英文名：    Sheep complement fragment 3a,C3a ELISA kit
绵羊白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA Kit    英文名：    Sheep Interleukin-8,IL-8 ELISA Kit
绵羊白介素6(IL-6)ELISA Kit    英文名：    Sheep Interleukin 6,IL-6 ELISA Kit
绵羊白介素4(IL-4)ELISA Kit    英文名：    Sheep Interleukin 4,IL-4 ELISA Kit
绵羊白介素1α(IL-1α)ELISA Kit    英文名：    Sheep Interleukin 1α,IL-1α ELISA Kit
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