elisa定量检测试剂盒实验的几个基本步骤

elisa定量检测试剂盒实验的几个基本步骤：
1.加样
◎加样应用微量移液器（加样枪）按规定的量加入微孔板的1/3处避免加在孔壁上部，并注意不可溅出，不可产生气泡。
◎每次加样应更换吸嘴，做到一人一吸头，以免发生交叉污染;干吸头预先在血清中抽吸三次。
◎样本稀释，目的是为了减少非特异性反应，所以一定要先加稀释液后加样本，特别注意加样后要在微量振荡器上振荡30秒钟，同时注 意防止液体溢出。如后面操作步骤中加二种以上试剂时均需振荡混匀。
◎如用滴瓶滴加试剂应先将滴瓶摇匀并挤去*滴有气泡的试剂后加样。
 2.温育
◎抗原抗体反应需要在一定温度下（37°C），经过一定的时间才能达到反应的平衡点
◎ELISA边缘效应是由温育形成的。所以温育一般采用能 使反应液温度迅速达到平衡的水浴法。一种放在水浴箱的隔板上，另一种是放在温箱的湿盒里。水要浸至板条的1/3处，不可将板条叠 加放置。
◎边缘效应（2ng/mlHBsAg一步法三种不同温育法的结果）
洗涤
◎ELISA是靠洗涤来达到分离结合与未结合抗原抗体复合物及酶标记物的目的，同时洗涤也可将非特异吸附的蛋白质的干扰以及血球 、细菌中的酶干扰清除掉。
◎手工洗涤一般采用浸泡方法：1）甩去孔内反应液；
2）用洗涤液过洗一遍（即注满孔后即甩去）；
3）微孔重新注满洗液后浸泡2-3分钟，间歇摇动；
4）甩去孔内液体，拍板，用纸吸干。
重复以上操作至少5次。注意各种试剂盒的洗涤液尽量不要混用。
◎洗板机洗板一定要预先把板架放平，使洗板机上的每个放液和吸液纤孔都能一致地插入孔底，将孔内液体全部吸干，同时要设置一定的 浸泡时间。如出现机洗后拍板有较多残留液时应再用手工洗2次以上。关机前要用蒸溜水冲洗管道，避免堵孔。
 3.显色
◎HRP催化底物的一步呈色反应，同样需要一定的时间和温度，
◎ 一定要按照说明书规定的时间温度（一般为37°C，10-15分钟）恒定反应后终止，
◎或根据临界值质控血清吸光度值达0.2左右使的时间而恒定反应时间。
 4.酶标仪判读结果
◎显色反应终止后应立刻比色（30分钟内）。
elisa定量检测试剂盒γ谷氨酰半*合成酶(γ-ECS)ELISA试剂盒    ，英文名：    γ-ECS ELISA Kit
γ*-半*合成酶(γ-GCS)ELISA试剂盒    ，英文名：    γ-GCS ELISA Kit
γ干扰素诱导蛋白16/p16(IFI16/p16)ELISA试剂盒    ，英文名：    IFI16/p16 ELISA Kit
γ干扰素诱导单核细胞因子(MIGF/CXCL9)ELISA试剂盒    ，英文名：    MIGF/CXCL9 ELISA Kit
γ干扰素受体(IFN-γR)ELISA试剂盒    ，英文名：    IFN-γR ELISA Kit
γ干扰素(IFN-γ)ELISA试剂盒    ，英文名：    IFN-γ ELISA Kit
γ干扰素(IFNγ)ELISA试剂盒    ，英文名：    IFNγ ELISA Kit
γ分泌素激活蛋白(PION)ELISA试剂盒    ，英文名：    PION ELISA Kit
γ氨基丁酸(GABA)ELISA试剂盒    ，英文名：    GABA ELISA Kit
β-转导素重复序列包含蛋白(BTRC)ELISA试剂盒    ，英文名：    BTRC ELISA Kit
β抑制蛋白2(ARRB2)ELISA试剂盒    ，英文名：    ARRB2 ELISA Kit
β血小板球蛋白/β血栓环蛋白(β-TG)ELISA试剂盒    ，英文名：    β-TG ELISA Kit
β血小板球蛋白(β-TG)ELISA试剂盒    ，英文名：    β-TG ELISA Kit
β细胞素(BTC)ELISA试剂盒    ，英文名：    BTC ELISA Kit
β位淀粉样前体蛋白裂解酶2(BACE2)ELISA试剂盒    ，英文名：    BACE2 ELISA Kit
β位淀粉样前体蛋白裂解酶1(BACE1)ELISA试剂盒    ，英文名：    BACE1 ELISA Kit
β-微精原蛋白(MSMB/PRSP)ELISA试剂盒    ，英文名：    MSMB/PRSP ELISA Kit
β-微管蛋白(TUBB)ELISA试剂盒    ，英文名：    TUBB ELISA Kit
β乳球蛋白(β-Lg)ELISA试剂盒    ，英文名：    β-Lg ELISA Kit
β羟丁酸(β-OHB)ELISA试剂盒    ，英文名：    β-OHB ELISA Kit
β葡萄糖醛酸苷酶(βGD)ELISA试剂盒    ，英文名：    βGD ELISA Kit
β葡萄糖苷酶(β-glucosidase)ELISA试剂盒    ，英文名：    β-glucosidase ELISA Kit
β葡糖苷酶(β-glucosidase)ELISA试剂盒    ，英文名：    β-glucosidase ELISA Kit
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