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细胞培养是生物学和医学研究常用的手段之一，可分为原代培养和传代培养两种。原代培养是直接从生物体获取组织或器官的一部分进行培养，也称初代培养。严格地说即从体内取出组织接种培养到第一次传代阶段，但实际上，通常把第一代至第十代以内的培养细胞统称为原代细胞培养。由于培养的细胞刚刚从活体组织分离出来，故更接近于生物体内的生活状态。这一方法可为研究生物体细胞的生长、代谢、繁殖提供有力的手段。原代细胞培养越来越多地用作细胞和分子生物学的主要工具，那么我们在原代细胞培养过程中可能存在哪些问题呢？一起来学习一下吧~
污染：转移主要组织进行培养时需要注意避免污染。
pH值变化：这可能是由于培养基中的盐分不正确，细菌或真菌污染，碳酸氢盐缓冲液不足，二氧化碳张力不正确等引起的。
粘附性不足（细胞不贴壁）：培养基中不含附着因子（attachment factors）或附着因子不足，培养皿或培养基污染，细胞被yi蛋白酶过度消化等。
生长缓慢：原因包括培养基的pH值变化，必需的促进生长的成分/因子耗尽，低污染，试剂储藏不当等。
细胞死亡：温度波动，二氧化碳含量过低，在融化和/或冷冻保存过程中细胞受损，有毒代谢产物浓度增加，培养基中的渗透压失衡导致细胞存活率降低。
沉淀（pH不变）：由于使用了冷冻培养基，在pH不变的培养基中可能会出现沉淀，残留的磷酸盐残留在用洗涤剂洗涤时可能会沉淀出粉末状的培养基成分。
细胞结块（细胞不贴壁且结块）：悬浮细胞可能由于钙、镁离子的存在（贯流时应使用不含钙、镁离子的D-Hank’s缓冲液（D-HBSS），而不能选择含有钙、镁离子的HBSS或可能含有钙、镁离子的PBS缓冲液）或细胞裂解及DNA释放（过度用蛋白水解酶消化）而结块。
诱导变异性：多种试剂和培养基会诱导原代细胞的数据产生变异，研究者的处理手法也可能导致原代细胞的数据产生变异。
以上就是关于原代细胞培养过程中可能存在哪些问题的解答，如果你想了解更多请咨询百奥创新客服哦~
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