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质粒是在细菌和其他细胞中发现的一种小型、环状DNA 分子。通常只携带少量基因,特别是一些与抗生素耐药性有关的基因;另外质粒可以在不同的细菌细胞之间传递因为质粒分子本身具有复制功能的遗传结构,可携带一些遗传信息,并且其自我复制能力和携带遗传信息能力非常强大,经过基因表达后可使其宿主细胞表现相应的性状,所以质粒常被用作基因载体,在分子生物学、生物化学与细胞生物学等学科中得到广泛的应用。那么质粒有哪些分类和用途?一起来学习下吧!
Cloning Plasmids 克隆质粒:用于促进 DNA 片段的克隆。克隆载体往往非常简单,通常只包含细菌抗性基因、复制起点和 MCS。
Expression Plasmids 表达质粒:用于基因表达(基因功能的研究)。表达载体必须包含启动子、转录终止子序列和插入基因。启动子驱动插入DNA 转录生成RNA,合成的RNA上的终止子序列发出停止转录过程的信号。表达载体可以通过增强子序列增加蛋白质或RNA的产量。表达载体可以在各种细胞类型(哺乳动物、酵母、细菌等)中驱动表达,这在很大程度上取决于用于启动转录的启动子。
Gene Knock-Down Plasmids 基因敲减质粒:用于减少内源基因的表达。通过表达靶向目的基因 mRNA的shRNA来实现。这些质粒具有可以驱动短 RNA 表达的启动子。
Genome Engineering Plasmids 基因工程质粒:用于靶向和编辑基因组。通常使用 CRISPR 技术完成。
Reporter Plasmids 报告质粒:用于研究遗传元件的功能。这些质粒包含一个报告基因(例如,荧光素酶或GFP),可提供遗传元件活性的读数。
Viral Plasmids 病毒质粒:通过修饰的病毒基因组,有效地将遗传物质递送到靶细胞中。可以使用这些质粒来制造病毒颗粒,例如慢病毒、逆转录病毒、AAV 或腺病毒颗粒,从而高效感染靶细胞。
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