济南高压灭菌是将待灭菌的物品放在一个密闭的加压灭菌锅内,通过加热,使灭菌锅隔套间的水沸腾而产生蒸汽。待水蒸汽急剧地将锅内的冷空气从排气阀中驱尽,然后关闭排气阀,继续加热,此时由于蒸气不能溢出,而增加了灭菌锅内的压力,从而使沸点增高,得到高于100℃的温度。导致菌体蛋白质凝固变性而达到灭菌的目的。在使用高压蒸汽灭菌锅灭菌时,灭菌锅内冷空气的排除是否极为重要,因为空气的膨胀压大于水蒸汽的膨胀压,所以,当水蒸汽中含有空气时,在同一压力下,含空气蒸汽的温度低于饱和蒸汽的温度。所以饱和蒸汽的灭菌更。
济南高压灭菌的流程:
1、排冷阶段
抽真空排冷两到三次,这种抽真空的做法是采用的脉动真空灭菌技术而来的。先用真空泵抽净灭菌锅内的冷空气,然后通入蒸汽,再次抽真空,如此重复操作两到三次,一共30分钟左右。
2、一计时阶段
排净冷空气后进入升温阶段,当灭菌锅内温度达到105℃时,维持20分钟。
3、二计时阶段
一阶段结束后继续升温,当灭菌锅内温度到达115℃时,维持20分钟。
4、三计时阶段
二阶段结束后继续升温,当灭菌锅内温度到达121℃时,维持90-120分钟。
5、降压阶段
三阶段结束后,灭菌锅所有阀门处于关闭状态,灭菌锅压力和温度开始下降,20分钟后,开始排气,准备出锅。
济南高压灭菌的注意事项:
1、汽未放尽前,不得开启高压锅;
2、如果灭菌后的培养基在锅内不及时拿出,需在蒸汽放尽后将锅盖打开,切忌将培养基封闭在锅内过夜。
3、压力表指针在0.05MPa以上时,不能过快放汽,以防止压力急速下降,液体滚沸,从培养容器中溢出。
4、操作过程,请注意安全,小心烫伤。