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劲马生物讲解了流式抗体的选择标准

来源:上海劲马实验设备有限公司   2014年03月13日 08:46  

由于在流式细胞实验过程中,荧光抗体对单细胞悬液的标记效果直接影响实验的数据质量。因此,需要考虑各种影响流式抗体品质及检测效果的因素,例如抗体特异性、荧光素信号强弱、荧光素标记方式、同型对照等。那么该怎么选择流式抗体呢,它有具体有哪些实验注意事项等等,对此针对这一系列问题,上海劲马生物公司特派技术人员来司受教,具体讲解了流式抗体的选择标准。

流式抗体的选择:

1. 流式抗体本身也是抗体,所以选择流式抗体一定要满足抗体选择zui基本的条件:目标蛋白特异性,反应种属以及应用实验。

2. 流式抗体荧光标记的方式包括直接标记和间接标记两种。在流式实验过程中,尽量减少实验工序和过程,以保证实验的真实和准确性。因此在条件允许的范围内,建议尽量用直接标记的抗体进行实验而不去做间接标记。

3. 流式抗体荧光标记的选择:如果实验中检测单一指标:不同荧光标记在不同的仪器上强度不同。FACS Calibur仪器为例:PE APC PE-Cy5 PerCP FITC PerCP-Cy5.5,通常来说,PEzui强,适用于弱表达抗原。FITC强度较弱,适用于强表达抗原,使用范围比较广。用户需根据检测的目标蛋白进行具体选择。如果同时检测多个指标:确认流式细胞仪能检测多少个通道:流式抗体每个通道只能选择1种荧光素。各个通道之间的荧光素可以随意搭配。如:实验者同时检测三个指标,可以在图1中绿色、黄色和红色三个通道中各选一个适当的荧光素标记,FITCPEPE-cy5。切忌所有指标选择同一个通道的荧光标记,以防止荧光的重叠和相互干扰,影响zui后结果。因此,流式细胞仪的通道越多,同一份样本能同时做的表面/胞内标志就越多。常用荧光标记包括FITC, PE, PEcy5, PEcy5.5, APC等。

经过我司技术的详细解答,您对流式抗体的选择有了进一步的认识了吗?买抗体就选上海劲马实验设备有限公司,我司提供产品的技术服务及产品详解报告,为您的实验提供*的服务

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