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超微量Na+K+—ATP酶测试盒的组成和操作原理

来源:上海百蕊生物科技有限公司   2015年08月05日 15:35  

超微量Na+K+—ATP酶测试盒的组成和操作原理

一、ATP酶存在于组织细胞及细胞器的膜上,是生物膜上的一种蛋白酶,它在物质运送、能量转换以及信息传递放免具有重要的作用,机体在缺氧及一些疾病状态下,此酶活力发生一系列改变,另外有些遗传疾病也与此酶活力有关。

二、测定原理:

ATP酶可分解ATP生成ADP及无机磷,测定无机磷的量可判断ATP酶活力的高低。

三、试剂组成和配置:



组分

50T/25

100T/50

保存

试剂一

液体

13ml X 1

13ml X 2

4℃保存6个月

试剂二

液体

4ml X 1

4ml X 2

4℃保存6个月

试剂三

粉剂

粉剂X 4

粉剂X 8

-20℃保存6个月

试剂三的配制:用时每支试剂三粉剂加双蒸馏水1ml,充分溶解。(用不完-20℃以下可保存一周。)

试剂四

液体

5ml X 1

5ml X 2

4℃保存6个月

试剂五

甲液

7ml X 4

7ml X 8

4℃保存6个月

乙液

6ml X 1

6ml X8

4℃避光保存6个月

注:试剂五乙液在冬天或4℃长时间保存时可能会出现凝胶状物质,37℃溶解不了,可将其60℃左右水浴10分钟即可*溶解;甲液、乙液应防止磷污染。

试剂六

液体

50ml X 1

50ml X 2

室温保存6个月

试剂七

10mmol/L

标准磷贮备液

5ml X 1

5ml X 1

4℃保存6个月

试剂十

贮备液

0.1ml X 3

0.1ml X6

4℃保存6个月

稀释液

0.9ml X 3

0.9ml X6

4℃保存6个月

试剂十的配制:取一支试剂十稀释液加入一支试剂十贮备液中,用不完的4℃保存。

0.1umol/ml标准磷应用液的配制:用时将10mmol/L磷贮备液100倍稀释,即取0.1ml加双蒸水至10ml

0.02umol/ml磷标准液的配制:用时将0.1umol/ml磷标准液用双蒸水5倍稀释,即取0.1umol/ml磷标准液1ml加双蒸水4ml

基质液的配制: 按试剂一:试剂二:试剂三=2608080比例混合。需多少配多少,现用现配

显色剂的配制:用时取一瓶试剂五甲液加入一瓶已预温好试剂五乙液中,充分混匀,需提前0.5小时配制,2--8℃条件下至少可保存5天,配好的显色剂的量够做13个管子(如果你的样本量很少,所需的显色剂的量较少,那么你可以按试剂五的甲液:乙液=7:6的比例自行配制显色剂,需多少配多少(按比例配制显色剂时要防止磷污染,用吸嘴)。

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