毛细管气相色谱法测定*中*的含量

【摘要】 目的采用毛细管气相色谱法测定*中*的含量，建立*质量控制体系。方法以邻苯二甲酸二正壬酯（ＤＮＰ）为内标，石英毛细管柱ＳＥ －５４（３０ ｍ ×０．３２ ｍｍ ×０．３２ μｍ）为固定相，氮气为载气，ＦＩＤ 检测器。结果在该色谱条件下，*在０．０８０ ～０．８０１ ｍｇ· ｍｌ－１的浓度范围内线性关系良好（r＞０．９９９ ５）；平均回收率为９９．４ ％，RSD为２．６％。结论该方法简单、灵敏、快速、回收率和重现性好，可以作为*的质量控制标准。

　　【关键词】  毛细管气相色谱法 * *

　　Abstract：ObjectiveＴｏ ｅｓｔａｂｌiｓｈ ａ ＧＣ ｍｅｔｈｏｄ ｆｏｒ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆ Ｍｏｒｐｈｉｎｅ ｉｎ Ｘｉａｏｃｈｕａｎ Ｃａｐｓｕｌｅｓ ｂｙ ｇａｓ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ．MethodsＤＮＰｗａｓ ｕｓｅｄ ａｓ ｔｈｅ ｉｎｔｅｒnａｌ ｓｔａｎｄａｒｄ ｓｕｂｓｔａｎｃｅ ．Ｔｈｅ ＧＣ ｓｙｓｔｅｍｃｏｎｓｉｓｔｅｄ ｏｆ Ｃａｐｉｌｌａｒｙ ｃｏｌｕｍｎ， ＳＥ －５４（３０ ｍ ×０．３２ ｍｍ ×０．３２μｍ）ａｓ ｔｈｅｓｔａｔｉｏｎａｒｙ ｐｈａｓｅ， ｎｉｔｒｏｇｅｎ ａｓ ｔｈｅ ｃａｒｒｉｅｒ ｇａｓ， ａｎｄ ＦＩＤ ａｓ ｔｈｅｄｅｔｅｃｔｏｒ．ResultsＭｏｒｐｈｉｎｅ ｈａｄ ａ ｇｏｏｄ ｌｉｎｅａｒｉｔｙ ｗｉｔｈｉｎ ｔｈｅ ｒａｎｇｅ ｏｆ０．０８０ ～０．８０１ ｍｇ· ｍｌ－１ ｕｎｄｅｒ ｔｈｅ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ； ｔｈｅ ｍｅａｎｒｅｃｏｖｅｒｙ ｏｆ mｏｒｐｈｉｎｅ ｗａｓ ９９．４％， ａｎｄ RSD ｗａｓ ２．６％．ConclusionＴｈｅｍｅｔｈｏｄ ｉｓ ｓｉｍｐｌｅ， ｓｅｎｓｉｔｉｖｅ ａｎｄ ｒａｐｉｄ ｗｉｔｈ ｓａｔｉｓｆａｃｔｏｒｙ ｒｅｃｏｖｅｒｉｅｓａｎｄ ｒｅｐｒｏｄｕｃｉｂｉｌｉｔｉｅｓ．

　　Key words：Ｃａｐｉｌｌａｒｙ ｇａｓ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ；  Ｘｉａｏｃｈｕａｎｃａｐｓｕｌｅｓ；  Ｍｏｒｐｈｉｎｅ

　　*是由罂粟壳、桔梗、麻黄、甘草等药物组成，具有养阴敛肺、止咳定喘，对于咳嗽、支气管炎、哮喘、慢性肺炎等疾患具有显著的疗效。罂粟壳为方中主药，含*、可待因、罂粟壳碱、罂粟碱、原阿片碱等成分［１］。*为罂粟壳中主要成分之一，控制成瘾性药品的含量，对于临床用药的安全性和活性评价具有较大的指导意义。罂粟壳中*的含量测定方法目前有ＧＣ［２］，ＨＰＬＣ［３］ ，ＧＣ －ＭＳ［４］法等见报道。本实验采用毛细管气相色谱法测定*中*的含量，该方法快速、灵敏、分离度好、重现性好，可为该类制剂的质量控制提供参考依据。

　　1  材料与仪器

　　1.1 试药*对照品（中国药品生物制品检定所，批号１７１２０１－２００３０９），其他所用试剂均为分析级，（*购买于贵阳药品超市，批号分别为２００６０９０１，２００６０９０２，２００６０９０３，２００６０９０４，２００６０９０５）。

　　1.2  仪器条件ＧＣ －１６Ａ气相色谱仪（日本岛津），ＳｅＰｕ３０００ 色谱工作站，石英气相色谱柱ＳＥ －５４（３０ ｍ ×０．３２ ｍｍ ×０．３２ μｍ），ＦＩＤ 检测器，载气Ｎ２ ，压力１００ ｋＰａ，流速７０ ｍｌ／ｍｉｎ，Ｈ２压力５０ ｋＰａ，空气压力５０ ｋＰａ，程序升温（１００℃ ；１ ｍｉｎ；１５℃／ｍｉｎ；２５０℃；１０ ｍｉｎ）、进样口／检测器温度２６０℃。

　　2  试液的制备

　　2.1  对照储备液的制备精密称*对照品适量，置２５．０ｍｌ容量瓶中，以甲醇稀释至刻度，摇匀，即得浓度为１．６０２ ｍｇ／ｍｌ 的储备液。

　　2.2  内标溶液的制备取邻苯二甲酸二正壬酯（ＤＮＰ）适量，加甲醇制成含邻苯二甲酸二正壬酯（ＤＮＰ）２．７７６ｍｇ／ｍｌ 的内标溶液。

　　2.3  对照品溶液的配制精密量取*的对照品储备液和内标液各１ ｍｌ，置１０ ｍｌ的量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得含*０．１６０ ｍｇ／ｍｌ，内标０．２７８ ｍｇ／ｍｌ 的对照品溶液。

　　2.4  供试品溶液的制备精密称取*２ ｇ，置２５ ｍｌ 具塞容量瓶中，加入２０ ｍｌ 甲醇和１ ｍｌ内标溶液超声处理３０ ｍｉｎ 取出、放冷加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得供试品溶液。

　　2.5 阴性实验取供试品溶液、供试品＋内标溶液、对照品溶液与阴性溶液（分别取缺罂粟壳的处方药材与基质，按工艺方法制成*的阴性样品，按“２．４”项的方法制备），注入气相色谱仪。结果表明，阴性样品在对照品相应位置上无色谱峰（见图１～４）。

　　图１  阴性样品（缺罂粟壳） 色谱图（略）

　　图２  供试品色谱图（略）

　　图３  对照品色谱图（略）

　　图４  供试品＋内标色谱图（略）

　　3  方法与结果

　　3.1  线性关系考察精密吸取０．５，１，２，３，４，５ ｍｌ 对照储备液溶于１０ ｍｌ 容量瓶中，精密加入１ｍｌ内标溶液并用甲醇稀释至刻度，摇匀，进样量２ μｌ，由对照品的进样量与对照品／内标峰面积进行回归。*的回归方程为：Y＝５．０６０７X－０．００３ ９５，R＝０．９９９ ９（n＝５），实验数据表明*在０．０８０ ～０．８０１ ｍｇ· ｍｌ－１的浓度范围内线性关系良好。

　　3.2  精密度实验对同一供试品溶液连续测定６ 次，样品中*的峰面积与内标的峰面积之比为０．５００１，RSD＝０．５７％。

　　3.3  重复性实验对同一批样品从取样开始重复测定５ 次，测得的*平均值为１．５６７，RSD＝０．８５％。

　　3.4  回收率的测定精密称取５ 份已测含量同一批号的*于２５ ｍｌ 容量瓶中，１ｇ／份，精密加入样品含量的*溶液和１ ｍｌ 内标溶液，用甲醇定容测定并计算回收率。结果见表１。

　　表1  回收率实验结果（略）

　　3.5  样品测定对５ 批样品进行含量测定，精密吸取供试品溶液及标准对照品溶液各２ μｌ注入气相色谱仪。按内标法以峰面积计算，即得。结果见表２。

　　表2  样品测定结果（略）

　　4  结论

　　结果表明，石英毛细管气相色谱法测定*中的*含量，速度快、分离度好、灵敏度高、定量准确，可为该类药物的质量控制提供参考。

　　【参考文献】

　　［1］ 陈发奎．常用中草药有效成分含量测定［ Ｍ］．北京：人民卫生出版社，１９９７：７７８．

　　［2］ 杜黎明，许庆琴，吴秀兰．大口径毛细管气相色谱法测定罂粟壳中的生物碱［ Ｊ］．色谱， １９９９，１７（６）：５７８．

　　［3］ 杨 元，陶锐．用峰鉴别技术反相液相色谱法测定火锅汤料中微量*［Ｊ］．分析化学，１９９４，２２（１０）：１０４１．

　　［4］ 刘 奋，戴京晶，林奕芝，等．ＧＣ ／ＭＳ 法测定掺入食品中罂粟壳残留的方法研究［Ｊ］．中国卫生检验杂志，２００３，１３ （ ６ ）：７１４．