ELISA试剂盒实验潜规则

ELISA试剂盒实验阳性断定值（cut-off value）通常为阴性对照A值加上一个特定的常数，以此作为判别成果阳性或阴性的规范。
用此法判别成果请求实验条件十分稳定，试剂的制备有必要规范化，阳性和阴性的对照品应契合一定的规范，须配用精密的仪器，并严厉按规定操作。
阳性断定值公式中的常数是在这特定的体系中经过对很多标本的实验检查而得到的。
ELISA试剂盒现举某种检查HBsAg的试剂盒为例。
平均数（PCX），两个平均数的差（P-N）有必要大于一个特定的数值（例0.400），实验才有用。
3个阴性对照A值均应≥0.5×NCX，并≤1.5×NCX，如其中之一超出此规模，则弃去，而已另两个阴性对照从头核算NCX；如有两个阴性对照A值超出以上规模，则该次实验无效。
应留意的是，式中0.05为该试剂盒的常数，只适合于该特定条件下，而不是对各种试剂均可通用。
根据以上叙说能够看出，在这种方法中阴性对照和阳性对照也起到实验的质控效果，试剂蜕变和操作不妥均会发生"实验无效"的后果。
标本/阴性对照比值 
在实验条件（包含试剂）较难确保稳定的情况下，ELISA试剂盒这种判别法较为适宜。
在得出标本（S）和阴性对照（N）的A值后，核算S/N值。也有写作P/N的，这儿的P不代表阳性（positive），而是患者（patient）的缩写，不该误解。为防止混淆，更宜用S/N表明。
ELISA试剂盒阳性断定值按下式核算：阳性断定值=NCX+0.05，标本A值＞阳性断定值的为阳性，小于阳性断定值的为阴性。
在竞赛法ELISA中，阴性孔呈色深于阳性孔。阴性呈色的强度取决于反响中酶结合物的浓度和参加竞赛按捺物的量，通常调节阴性对照的吸光度在1.0-1.5之间，此刻反响zui为敏感。
竞赛法ELISA不易用自视判别成果，因肉眼很难区分弱阳性反响与阴性对照的显色区别，通常均用比色计测定，读出S、P和N的吸光值。
核算方法首要也有两种，即阳性断定值法和按捺率法。
阳性断定值法
与间接法和夹心法中的阳性断定值法根本一样，ELISA试剂盒但在核算公式中引进阳性对照A值，现举某种检查抗HBc的试剂盒为例。
试剂盒中的阴性对照为不含抗HBc的复钙人血浆，阳性对照中抗HBc含量为125±100u/ml。
每次实验设2个阳性对照和3个阴性对照。测得A值后，先核算阴性对照A值的平均值（NCX）和阳性对照A值的平均数（PCX），两个平均数的差（N-P）有必要大于一个特定的数值（例如0.300）,实验才有用。
3个阴性对照A值均应小于2.000，并且应≥0.5×NCX并≤1.5×NCX，如其中之一超出此规模，则弃去，而以另2个阴性对照从头核算×NCX；如有2个阴性对照A超出以上规模，则该次实验无效。
ELISA试剂盒阳性断定值按下式核算：阴性断定值=0.4×NCX+0.6×PCX，标本A值≤阳性断定值的反响为阳性，A＞阳性断定值的反响为阴性。