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ELISA实验中样本的收集方法

来源:上海晶抗生物工程有限公司   2017年03月02日 09:53  

ELISA试剂盒在搜集标本前都必须有一个完整的方案,必须明白要检查的成份是不是满足安稳。新鲜标本应尽早检查,对搜集后当天就进行检查的标本,应及时储存在4℃备用。如因特别原因需求定时、屡次搜集标本,请选材后,将标本及时分装后放在-20℃或以下条件下保留。因为蛋白样品多不安稳,很容易降解,应防止重复冻融,以削减对试验的影响。今日咱们和我们共享ELISA试验中样本的搜集办法:

一、液体类标本,液体类标本包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。

血清:室温血液天然凝结10-20分钟后,离心20分钟摆布(2000-3000转/分)。细心搜集上清。保留过程中如有沉积构成,应再次离心。
血浆:应根据标本的要求挑选EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟摆布(2000-3000转/分)。细心搜集上清。保留过程中如有沉积构成,应再次离心。
尿液:用无菌管搜集。离心20分钟摆布(2000-3000转/分)。细心搜集上清。保留过程中如有沉积构成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实施。
细胞培养上清:检查排泄性的成份时,用无菌管搜集。离心20分钟摆布(2000-3000转/分)。细心搜集上清。检查细胞内的成份时,用PBS(pH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml摆布。经过重复冻融,以使细胞损坏并放出细胞内成份。离心20分钟摆布(2000-3000转/分)。细心搜集上清。保留过程中如有沉积构成,应再次离心。
二、安排标本:采集标本后,称取安排净重,用液氮敏捷冷冻保留备用。标本消融后要保留在2-8℃的温度,参加一定量的PBS(pH7.2-7.4),用手艺或电动匀浆器将标本充沛匀浆。4℃离心(10000-15000转/分)10-20分钟。搜集上清,留取适当检查,其他冷冻保留备用。

补白:假如样本中的待检物需求提纯,请客户自行处理。

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