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进口原装elisa试剂盒技术中浓度的选择条件

来源:上海一研生物科研有限公司   2017年11月23日 12:45  

进口原装elisa试剂盒方法技术中,首先要确定的变异因素就是酶标记物的工作浓度。因为酶标记物浓度的很小的一个变化,便会导致整个试验结果产生很大的波动。另外,由于浓度过高,会使非特异性反应增加,而浓度过低又会影响测定的敏感性。因此,在正式准备试验前必须准确滴定其工作浓度,才能完善整个实验。
    1. 酶标记抗体的滴定方法是:将抗原(或抗体)物理吸附于固相载体上,然后将经过一系列稀释的酶标抗体(或抗Ig抗体)与吸附在载体上的抗原(或抗体)起反应,以酶与底物的显色反应程度来确定酶标记抗体的效价,或称工作浓度。
    2. 其步骤为:先将抗原(或抗体)用0.05M PH9.6包被缓冲液稀释为10μg/ml左右,于聚苯乙烯板孔内加0.1ml,4℃一夜,次日以洗涤缓冲液洗涤3次。酶标记抗体用1%BSA-PBS液依次稀释成1:100,1:200,1:400,1:800,1:1600(根据据抗体的滴度而定),分别加入反应孔中,每个稀释度二孔,每孔0.1ml,37℃孵育1小时后洗涤。然后加底物液,每孔0.1ml,37℃10~30分钟。以2M H2SO4 0.05ml终止反应。
    3. 结果判定主要是以进口原装elisa试剂盒比色仪(酶标仪)读取各孔的OD值,并以OD为纵座标,结合物浓度为横座标,绘制滴定曲线。由曲线上查得OD值为1.0左右,且曲线斜率zui大时的酶标抗体稀释度,即为该标记物的工作浓度。
Benzoyloxypeoniflorin    苯甲酰氧化芍药苷    20mg    72896-40-3
Benzoylmesaconine    苯甲酰新乌头原碱    20mg    63238-67-5
Benzoylaconine    苯甲酰乌头原碱    10mg    466-24-0
Benzoylpaeoniflorin    苯甲酰芍药苷    20mg    38642-49-8
Benzoylhypacoitine    苯甲酰次乌头原碱    20mg    63238-66-4
Benzoic acid    苯甲酸    20mg    65-85-0
Peimisine    贝母辛    10mg    19773-24-1
Peiminine    贝母素乙    20mg    18059-10-4
Peimine    贝母素甲    20mg    23496-41-5
进口原装elisa试剂盒

 

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