上周五，客户张老师联系我司业务员，跟我司业务员反应elisa试剂盒相关问题，张老师在提到实验中发现几个问题，希望我司技术能给出参考意见。

客户张老师对于elisa试剂盒在实验中所遇到的问题，关于张老师所提出的elisa试剂盒常见问题，我司陈技术根据长期Elisa经验这样作出解答的：

张老师：

1、我看见有的夹心ELISA试剂盒中检测抗体和捕获抗体为一种抗体，而不是分别针对待测抗原的不同表位的一对抗体。 

我不理解的地方是：捕获抗体把抗原上的表位都结合完了，检测抗体怎么能与抗原结合呢？

问题1：正常情况下，双抗体夹心法中使用的包被抗体和酶标记抗体肯定不是同一个抗体，如果是同一个的话，会有很强的竞争，应该是无法做的。你是怎么知道别人试剂盒中使用的是同一个抗体的呢，这应该是无法了解的呀。

2、在网上可以搜索到有关夹心ELISA检测TNF、CEA、IL－2、IL－8等说明书，我发现它们所用的稀释液配方都不一样，差别很大。

TNF-a的稀释液：PBS 100ml；BSA(牛血清白蛋白) 0.1g。 

IL-6的稀释液：洗涤液 100ml  BSA(牛血清白蛋白) 0.1g。 

IL-8的稀释液：洗涤液 100 ml；

PEG(聚乙二醇，MW6000) 3.0g。 

我想知道是根据什么原则来选择稀释液的组成？有没有可以通用的啊？谢谢！

问题2：稀释液基本上是和所使用的原料有关，不同的原料组成的检测相同物质的试剂盒所使用的稀释液就可能不同。

从你提供的数据看，IL-6的稀释液应该只比TNF-a多了个Tween－20而已，差别不是很大。至于选BSA还是PEG那就和原料有很大关系了。

　　Elisa试剂盒中有任何无法操作及解析的问题均联系我司，我们为您提供专业的售前，售后意见。