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核黄素转运因子1(RFT1)ELISA试剂盒使用操作步骤

来源:上海莼试生物技术有限公司   2020年04月29日 15:53  

核黄素转运因子1(RFT1)ELISA试剂盒使用操作步骤:
1. 从室温平衡 20min 后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回 4℃。
2. 设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品 50μL;
3. 样本孔中加入待测样本 50μL;空白孔不加。
4. 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL),静置 1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板 5 次(也可用洗板机洗板)。

5. 除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育 60min。

6. 每孔加入底物 A、B 各 50μL,37℃避光孵育 15min。
7. 每孔加入终止液 50μL,15min 内,在 450nm 波长处测定各孔的 OD 值。

备注:
1. 标准品浓度依次为:80、40、20、10、5、2.5 U/L
2. 经过大量正常标本检验,标本的正常浓度值均在试剂盒提供的检测范围内,实验过程中直接取50μL样本上样即可。当有部分样本值超过Z大标准品浓度时,可用*将标本进行适当稀释后再进行实验。

 

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