大鼠5-羟色胺elisa检测试剂盒技术原理:

1. 抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。

2. 结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性。

3. 酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性，又保留酶的活性。

4. 受检标本与固相载体表面的抗原或抗体起反应。再加入酶标记的抗原或抗体，也通过反应而结合在固相载体上。

5. 此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。

6. 加入酶反应的底物后，底物被酶催化成为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。测定方法具有很高的敏感度（pg-ng/ml水平），并且重复性好。以免疫学反应为基础，将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。

大鼠5羟色胺elisa检测试剂盒操作时需注意事项：

1.标准品的稀释与加样

2.加样：分别设空白孔空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl样品终稀释度为5倍。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4.配液：将3048t的20倍倍浓缩洗涤液用蒸馏水3048t的20倍倍稀释后备用。

5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。

6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。

7.温育：操作同3。

8.洗涤：操作同5。

9.显色：每孔先加入显色剂a50μl，再加入显色剂b50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.

10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应此时蓝色立转黄色。

11.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度od值。测定应在加终止液后15分钟以内进行。