1. 标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在di一、第二孔中分别加标准品100μl,然后在di一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从di一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为180 ng/L,120 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,15 ng/L)。
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7. 温育:操作同3。
8. 洗涤:操作同5。
9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟。
小鼠花生四烯酸5脂氧合酶(Alox5)ELISA试剂盒
小鼠花生四烯酸(AA)ELISA试剂盒
小鼠红细胞生成素受体(EPOR)ELISA试剂盒
小鼠红细胞生成素(EPO)ELISA试剂盒
小鼠横纹肌辅肌动蛋白α(sm Actinin-α)ELISA试剂盒
小鼠黑色素细胞抗体(MC Ab)ELISA试剂盒
小鼠黑色素瘤(Melanoma)ELISA试剂盒
小鼠核转录因子kBP65(NFkBP65)ELISA试剂盒
小鼠核转录因子1(AP-1)ELISA试剂盒
小鼠核因子-κB亚基p65亲和肽(NF-κB p65)ELISA试剂盒
小鼠核因子κB亚基p65亲和肽(NF-κB p65)ELISA试剂盒
小鼠核因子κB受体活化因子配基(RANKL)ELISA试剂盒
小鼠核因子κB受体活化剂配体(RANKL)ELISA试剂盒
小鼠核因子κB(NF-κB)ELISA试剂盒
小鼠核因子κB(NF-Kb)ELISA试剂盒
小鼠核因子E2相关因子2(Nrf2)ELISA试剂盒
小鼠含免疫球蛋白样环和上皮生长因子样域酪氨酸激酶2(Tie-2)ELISA试剂盒
小鼠含免疫球蛋白样环和上皮生长因子样域酪氨酸激酶1(Tie-1)ELISA试剂盒
小鼠还原型谷胱甘肽(GSH)ELISA试剂盒
小鼠过氧化脂质/乳过氧化物酶(LPO)ELISA试剂盒
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