丙酮酸脱羧酶(PDC)测试盒样本处理及要求:
1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到
100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5. 组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
6. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.
7. 不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
MCF-7(MCF7)(ATCC来源), 人乳腺癌细胞
MDA-MB-231(ATCC来源), 人乳腺癌细胞
Raji,人Burkitt's淋巴瘤细胞
Saos-2,人成骨肉瘤细胞
Caco-2,人结直肠腺癌细胞
NCI-N87 [N87]人胃癌细胞
MGC80-3(MGC-803)人胃癌细胞
EC109,人食管癌细胞
HGC-27人胃癌细胞
AGS人胃腺癌细胞
U251人胶质瘤细胞
THP-1人单核白血病细胞
HuH-7人肝癌细胞
RBE, 人肝胆管癌细胞
MiaPaCa-2, 人胰腺癌细胞
KM3, 人多发性骨髓瘤细胞
QGY-7701, 人肝癌细胞
PANC-1, 人胰腺癌细胞
U266B1 [U266], 人多发性骨髓瘤细胞
Hep G2, 人肝癌细胞系
PC-12(高分化),PC12,大鼠肾上腺髓质嗜铬瘤分化细胞株(高分化)
GH3, 大鼠垂体生长激素腺瘤
Hepa 1-6, 小鼠肝癌细胞
QBC-939, 人胆管癌细胞
B16-F10, 小鼠黑色素瘤高转移细胞
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