使用蛋白层析柱，要注意接头可不能漏气

来源：苏州汇通色谱分离纯化有限公司 2022年06月12日 09:07

　　蛋白层析柱是凝胶层析技术中的主体，我们研究所用的就是同兴玻璃仪器，一般用玻璃管或有机玻璃管。根据样品混合物中各组分在固定相和流动相中分配系数不同，从而分离的一种层析法。

　　蛋白层析柱是凝胶层析技术中的主体，一般用玻璃管或有机玻璃管。层析柱的直径大小不影响分离度，样品用量大，可加大柱的直径，一般制备用凝胶柱，直径大于2厘米，但在加样时应将样品均匀分布于凝胶柱床面上。此外，直径加大，洗脱液体体积增加，样品稀释度大。

　　层析柱的直径大小不影响分离度，样品用量大，可加大柱的直径，一般制备用凝胶柱，直径大于2厘米，但在加样时应将样品均匀分布于凝胶柱床面上。此外，直径加大，洗脱液体体积增加，样品稀释度大。分离度取决于柱高，为分离不同组分，凝胶柱床要有适宜的高度，分离度与柱高的平方根相关，但由于软凝胶柱过高挤压变形阻塞，一般不超过1米。

　　注意事项：

　　1、各接头不能漏气，连接用的小乳胶管不要有破损，否则造成漏气、漏液。

　　2、装柱要均匀，既不过松，也不过紧，要在要求的操作压下装柱，流速不宜过快，避免因此压紧凝胶。

　　3、始终保持柱内液面高于凝胶表面，否则水分蒸发，凝胶变干。也要防止液体流干，使凝胶混入大量气泡，影响液体在柱内的流动。

　　4、所用凝胶比较昂贵，需小心操作，实验后回收，尽量避免浪费和损失。

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