紫外可见分光光度计测定荧光检测分析用干涉滤光片的透过率

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紫外可见分光光度计测定荧光检测分析用干涉滤光片的透过率

来源：北京普析通用仪器有限责任公司 2022年08月05日 14:34

　　荧光检测分析用干涉滤光片是荧光检测器中的最重要的光学器件，滤光片组合对信噪比起至关重要的作用。同时滤光片的质量、优劣也影响了仪器整体的性能，所用对荧光检测分析用干涉滤光片的质量测试成为生产制造荧光检测设备必要的环节。

　　本文依据《JB T 13360-2018 荧光检测分析用干涉滤光片》使用 T10 紫外可见分光光度计及可变角度附件对荧光分析用干涉滤光片进行检定，可以用于对荧光分析用干涉滤光片光学性能的检验。

　　实验方法

　　1.1 仪器设备

　　T10 紫外可见分光光度计

附件：可变角度样品架

　　1.2 测试条件

　　1.2.1 通带透过率测试条件

　　波长范围：300nm~900nm

　　测试模式：T%

　　光谱带宽：0.2nm

　　扫描间隔：0.2nm

　　扫描速度：中速

　　分色镜:测试光入射角 45°

　　1.2.2 截止带背景截止度条件

　　波长范围：300nm~900nm

　　测试模式：Abs

　　光谱带宽：0.5nm

　　扫描间隔：2nm

　　扫描速度：中速

　　1.3 样品

　　激发滤光片(长8.0mm宽5.5mm厚0.6mm) ；

　　发射滤光片(长8.0mm宽5.4mm厚0.6mm) ；

　　分色镜(长 8.0mm 宽 6.4mm 厚 0.6mm) ；

　　结果与分析

　　2.1 透过率测试

　　(1)激发滤光片 0°角透过率谱图(图 2-1)：

　　透过率>90%范围：378.4nm~583.8nm

　　50%截止波长：586nm

　　中心波长：481.1nm

2-1 激发滤光片使用 T10 扫描 0°角透过率谱图

　　(2)发射滤光片 0°角透过率谱图(图 2-2)

　　透过率>90%范围：610.2nm~860nm ；

　　50%截止波长：607.2nm

图 2-2 发射滤光片使用 T10 扫描 0°角透过率谱图

　　(3)分色镜 45°角透过率谱图(图 2-2)

　　平均透过率>85%范围：670nm~820nm ；

　　50%截止波长：638.8nm

图 2-3 分色镜使用 T10 扫描 45°角透过率谱图

　　2.2 截止带背景截止度测试

　　(1)激发滤光片吸光值谱图(图 2-4)：

　　OD 大于 4 范围：596nm~855nm

图 2-4 激发滤光片使用 T10 扫描吸光值谱图

　　(2)发射色滤光片吸光值谱图(图 2-5)：

　　OD 大于 4 范围：475nm~590nm

图 2-5 蓝绿色滤光片使用 T10 扫描吸光值谱图

　　2.3 重复性测试

　　(1)滤光片透过率重复性测数据(表 2-1)

　　表 2-1 发射滤光片重复性检测结果

图 2-6 发射滤光片扫描透过率重复性谱图

　　(2)滤光片背景截止度重复性测数据(表 2-2)

　　表 2-2 发射滤光片检测结果

图 2-7 发射滤光片扫描吸光值重复性谱图

　　讨论

　　本文依据《JB T 13360-2018 荧光检测分析用干涉滤光片》，使用低杂散光紫外可见分光光度计T10 及可变角度附件对 I 型荧光分析用干涉滤光片的通带透过率(要求激发滤光片和发射滤光片 0°入射透过率>90%；分色镜 45°入射透过率>85%)、截止带背景截止度(要求 OD 值>4)进行检定，结果准确，重复性好。在 0.2nm 光谱带宽的条件下噪音小，在 OD 值大于 4 时的结果依然准确，可以有效满足对荧光分析用干涉滤光片光学性能的检验的要求。

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