液相色谱使用要求快来看看吧！

来源：赛默飞色谱及痕量元素分析 2023年04月18日 16:27

　　液相色谱，在一玻璃管中放入碳酸钙，将含有植物色素(植物叶的提取液)的石油醚倒入管中。此时，玻璃管的上端立即出现几种颜色的混合谱带。然后用纯石油醚冲洗，随着石油醚的加入，谱带不断地向下移动，并逐渐分开成几个不同颜色的谱带，继续冲洗就可分别接得各种颜色的色素，并可分别进行鉴定。是利用混合物在液-固或互不相溶的两种液体之间分配比的差异，对混合物进行先分离而后分析鉴定的仪器，应用极其广泛。此种仪器在使用过程中，难免会出现各种各样的问题，并将直接影响到所测数据的准确性和仪器的正常工作。因此，在使用维护过程中，对液相色谱仪的要求：

　　1.流动相必须用HPLC级的试剂，使用前过滤除去其中的颗粒性杂质和其他物质(使用0.45μm或更细的膜过滤)。

　　2.流动相过滤后要用超声波脱气，脱气后应该恢复到室温后使用。

　　3.不能用纯乙腈作为流动相，这样会使单向阀粘住而导致泵不进液。

　　4.使用缓冲溶液时，做完样品后应立即用去离子水冲洗管路及柱子一小时，然后用甲醇(或甲醇水溶液)冲洗40分钟以上，以充分洗去离子。对于柱塞杆外部，做完样品后也必须用去离子水冲洗20mL以上。

　　5.长时间不用仪器，应该将柱子取下用堵头封好保存，注意不能用纯水保存柱子，而应该用有机相(如，甲醇等)，因为，纯水易长霉。

　　6.每次做完样品后应该用溶解样品的溶剂清洗进样器。

　　7.C18柱不能进蛋白样品，血样、生物样品。

　　8.堵塞导致压力太大，按预柱→混合器中的过滤器→管路过滤器→单向阀检查并清洗，清洗方法：

　　①以异丙醇作溶剂冲洗；

　　②放在异丙醇中间用超声波清洗；

　　③用10%稀硝酸清洗；

　　9.气泡会致使压力不稳，重现性差，所以在使用过程中要尽量避免产生气泡。

　　10.如果进液管内不进液体时，要使用注射器吸液：通常在输液前要进行流动相的清洗。

　　11.要注意柱子的pH值范围，不得注射强酸强碱的样品，特别是碱性样品。

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