PCR产物纯化效率提升要点汇总

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来源：上海抚生实业有限公司 2024年05月27日 13:39

PCR扩增完成后需要进行琼脂糖凝胶电泳检测，在条带单一无其他杂带的情况下，可以直接对产物进行纯化。提升PCR产物纯化效率要点汇总如下：

1.模板纯度，有较多蛋白或其他杂质时，会一定程度影响pcr效率；

2.模板量，过高的模板量反而会降低pcr效率特异性；

3.引物，引物的长度xu要再效率和特异性间获得优化，其次要控制引物gc含量；

4.聚合酶，要考虑酶的保真率和速度；

5.mg离子浓度，mg离子浓度过高会降低特异性，浓度过低会降低效率；

6.退火温度：退火温度低，效率会高，但特异性降低；退火温度高，效率降低，但特异性会提高，需优化。

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