1.溶解氧

由于冬季测试温度设定在 20°C，溶解氧过饱和，夏季采集的样品在 20°C 时可能会出现欠饱和。这些样品应在 BOD5 测定之前进行搅拌和充气，以将溶解氧调节到 20°C 饱和点附近。

2、pH

待测水样的pH值应调至6.7~7.5（点为pH7.2）。 BOD5读数下降可能是因为被测样品的pH值超过了这个范围，含有大量的酸或碱。样品中，BOD5 读数可能低于实际含量。

酸性或碱性水样应使用适当浓度的 NaOH 或 H2SO4 中和。

如果工业废水含有酸性或盐的氧化物，或需要高度稀释，对于标准的五天 BOD5 测定，可以使用 pH 7.2 的磷酸盐缓冲液作为稀释剂。

3.温度

实验期间将搅拌器置于 20°C ± 1°C 的培养箱中。 BOD的测定也可以超过这个温度范围。例如，在 35°C 或 37°C 时，测量 BOD 所需的时间可分别缩短至 2.5 天或 34 小时，测量结果与 五日20°C相似。升高温度得到的BOD值与第5天在20℃下测得的结果有很好的相关性。

如果采样过程中样品温度超过 20°C，或样品温度低于 20°C，可将样品置于恒温箱中恒温。样品需要在样品测量之前进行处理。

4、BOD5的稀释

仪器的测量范围为0～1000mg/L。如果测试样品的 BOD5 估算值高于 1000mg/L，可用稀释水稀释样品。加入的稀释水也应保持在20°C，并应使用曝气使氧气饱和。如果需要测试几个相同的样品，应将足够量的原始水样稀释，并从稀释后的样品中取出与测量范围相对应的体积。 .例如，原水样稀释两次时，稀释倍数为2；原水样按1:10稀释时，稀释倍数为10。

5. BOD5 的接种

什么是接种

BOD5实验要求水样中含有用于生物氧化的有机物和含有适量氧化性有机物的好氧菌，吞食促进好氧菌生长的有机物和其他微生物。如果水样中没有或几乎没有此类微生物，则必须将一定比例的此类微生物添加到水样中。这个过程应该称为接种。

与生活污水不同，工业废水可能没有足够的细菌来生化分解样品中所含的有机物。如果待测样品为此类废水，应加入接种液。

6、BOD5的接种方法

接种溶液的制备

用于接种的溶液是未经处理的新鲜生活污水的上清液，在 20°C 下放置 24-36 小时。

在下次实验中，若要使用以前测定过的水样作为接种液应经滤纸过滤，这种滤液在冷藏（约20℃）、避光的条件下保存，一般在二个月内可能是有效的。

将待测样品放入培养瓶中，用吸管向样品中加入2～5滴接种物（视样品量而定）。按照步骤测量BOD5，五天后得到的读数可作为测试样品的真实BOD5值。

注意：使用上述方法接种时。没有必要校正接种的 BOD5 读数。由于加入的接种量相对于水样量来说太少，不会影响BOD5读数。如果上述方法不能诱导水样中有机物的生物降解，可以增加接种量。如果 BOD5 分析仪的读数受到接种物添加的影响，可以同时测试接种物和样品，进行平行样品测定。

接种量通常为1%、5%和10%。