ELISA实验关键的洗涤参数和建议

ELISA实验中的洗涤参数对实验结果的准确性至关重要。以下是关键的洗涤参数和建议：

1. 洗涤量：

    建议使用350µl洗涤液进行洗涤，以确保整个反应孔壁得到清洁。洗涤量越高，残留的抗体或抗原量越少，但过多可能会导致液体溢出。

    如果之前遇到过高背景，可以将洗涤量调高，最好是比包被体积更高，以减少背景。

2. 洗涤次数：

1) 常规做法是在每次抗体或抗原孵育后重复洗涤三次。包被平板需要的洗涤次数可能比用户包被的平板少，因此需要根据具体实验优化洗涤次数。

2) 增加洗涤次数可以降低背景，但太多次洗涤会降低信号强度，影响测定。

3. 控制洗涤量和次数的替代方法：

    可以加入过量的洗涤液，如96孔板的每个孔能容纳330至460 µl，但有些自动化洗板机可设置程序，分配远远超出这个量的洗涤液，比如1 ml。通过在分液的同时打开吸液功能，实现增加洗涤量而不溢出。

4. 抽吸参数：

    吸液高度和吸入位置可以调整，以降低背景（残留量）和差异。<cite>1</cite>

5. 洗板机使用注意事项：

1) 使用洗板机时应注意洗涤参数，包括洗涤量和洗涤次数，确保条件恒定。

2) 洗涤参数的调整应根据实验需求和试剂盒说明书进行。

通过合理设置和优化这些洗涤参数，可以有效减少背景信号，提高ELISA实验的特异性和灵敏度。