PCR仪温度检定系统 PCR仪升降温速率均匀性校准 pcr仪温度校准
在分子生物学实验室中,PCR仪被誉为基因研究的“心脏”,其温度控制的精确度直接决定了实验结果的可信度。一次错误的温度循环可能导致假阴性或假阳性结果,甚至使数天的实验功亏一篑。
PCR技术通过精确的温度循环实现DNA扩增,每个循环包括变性、退火和延伸三个阶段,温度控制的微小偏差都会导致扩增效率降低甚至失败。
《JJF1527-2015聚合酶链反应分析仪校准规范》明确要求对PCR仪的温度示值误差、温度均匀性、平均升温速率、平均降温速率等关键参数进行定期校准1。实验证明,仅0.5℃的温度偏差就可能导致扩增效率下降20%,使定量结果**不可靠。
校准规范
《JJF1527-2015聚合酶链反应分析仪校准规范》中提出对聚合酶链反应分析仪的计量特性包括温度示值误差、温度均匀性、平均升温速率、平均降温速率、样本示值误差和样本线性。校准装置包括精密温度传感器(通常为15个)和数据采集分析模块,测温范围0-120℃,不确定度小于等于0.1℃。
如何判定PCR仪
(一)、温度准确性
温度准确性是PCR仪重要的性能指标,如温度准确性低可直接造成非特异性扩增,甚至是错误的扩增结果,造成假阳性和假阴性。
市场上各家厂商考核基因扩增仪(PCR仪)性能的主要指标,一般厂家的企业指标为±0.5℃,一些性能较好的产品可以实现的温度准确度为±0.3℃。故需对PCR仪控温准确度进行测试。校准实验平均温度的计算公式为:I—参加检测的温度探头序号;n—参加检测的温度探头的数量
(二)、温场均匀性
由于PCR仪加热不均匀,导致PCR仪上各孔存在一定温差。造成试验结果偏差。一般PCR仪边缘点的温度低于中间区域,所以均匀性为PCR仪重要的性能指标。一般厂家的企业指标规定均匀性为±0.5℃,一些性能较好的产品可以实现的温度均匀度为±0.3℃。校准实验时,通过选取孔板中16个特殊反应位置来测量温度,并得出孔板的温度均匀性。均匀性为各个探头在同一时刻max温度与min 温度的差值。
(三)、升降温速率
PCR扩增产物数量的多少决定了PCR的效率。为了在短时间内获得尽可能多的产物,需要仪器在升降温段具有按照预设升降温速率快速升温和降温的能力(max-升温速率达15~20℃)。一个完整的PCR过程,是由若干个升温→恒温→降温循环构成的。因为“变性”,“退火”和“延伸”3个阶段是必须要***的。因此,只有使升降温的过程尽可能地迅速,才能缩短每个PCR循环以及整个PCR 过程所需时间。一般厂家的企业指标规定升温速率为±3℃/sec。
仪器校准实验时,升温速率为温度从40℃到90℃的时间;降温速率为温度从70℃到35℃的时间。
(四)、max-超调温度
超调温度过大同样会对试验产生影响,所以校准实验时,需要计算max-超调温度和平均超调温度。
PCR仪温度检定系统 PCR仪升降温速率均匀性校准 pcr仪温度校准:
pcr仪温度校准装置是合肥智测电子有限公司自主研发的针对PCR仪温度测试和校准应用的专业性、系列化产品,符合国标《JJF 1527-2015 聚合酶链式反应分析仪校准规范》。
智测电子pcr仪温度校准装置符合《JJF1527-2015聚合酶链反应分析仪校准规范》,由精密测温探头、高精度测温仪1611A和数据采集软件组成。产品采用创新的一体化设计,在满足高精度温度采集的同时轻巧便携,可对国内外PCR仪器厂商不同型号、不同孔数(384/96/60/48/32/16/8/单孔等)的PCR仪器进行温度实时采集和校准,满足计量校准机构、生物实验室、仪器厂商对PCR仪温度测试和校准的需求。
智测电子还提供ZCTB系列高精度智能恒温槽、PCR专用校准等温块、二等标准温度计等装置可以对测温探头进行校准,整套方案保障温控探头的精度。ZCTB校准智能恒温槽满足国家计量检定规程的要求,具有温度扫描功能、上升和保持功能及自动大功率加热/制冷控制功能等,有优异的温场稳定性和均匀性,升降温速率快,噪音小。
产品特点
1、多路检测,高速采集。系统配备高精度测温仪1611A,采集速度可达10ms/通道。
2、探头响应速度快,长期稳定性佳,符合ITS-90国际标准,均可溯源,满足规程JJF1527-2015校准规范的0.1℃精度要求。
3、测温仪支持两种供电方式,既可充电又可插电,方便实验室和到现场使用。
基因扩增仪温度校准装置 多通道PCR温度计
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