苏丹红ELISA试剂盒操作步骤
实验开始前,请提前配置好所有试剂,试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。每次检测都应该做标准曲线。如样品浓度过高时,用样品稀释液进行稀释,以使样品符合试剂盒的检测范围。
酶联板使用前用洗液板2-3次,每次浸泡1-2分钟,250ul/每孔,甩干。
加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100ul,余孔从高到低分别加标准品或待测样品50ul,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,然后在所有孔中加入50ul苏丹红抗体工作液。尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。酶标板加上盖或覆膜,37℃反应30分钟(为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液)。
温育后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,250nl/每孔,甩干。
所有孔中加入100ul辣根过氧化物酶标记二抗工作液。尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。酶标板加上盖或覆膜,37℃反应30分钟。
温育后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,250ul/每孔,甩干。
依序每孔加底物溶液90ul, 37℃避光显色(30分钟内,一般10-15分钟内,此时肉眼可见标准品的后3-4孔有明显的梯度蓝色,前3-4孔颜色不明显,即可终止)。
依序每孔加终止溶液50ul,终止反应(此时蓝色立转黄色)。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。
用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。在加终止液后15分钟以内进行检测。
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苏丹红ELISA试剂盒本试剂盒仅供研究使用
检测范围:0.312ng/ml-10ng/ml
zui低检测限:0.2ng/ml
特异性:本试剂盒可用于快速检测苏丹红,与对们红有一定交叉反应。
有效期:6个月
预期应用:ELISA法定量测定鸡蛋、辣椒、辣椒酱等样品中的苏丹红残留。
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