从复杂的细胞混合物中分离出特定的细胞，是研究人员经常要面对的挑战。就目前而言，三种应用zui广泛的技术是：离心、荧光激活细胞分选（FACS）和磁性细胞分选。离心是*的，但也zui不特异，主要依靠细胞的物理特征（如密度）进行分离，而基于表型分离细胞的能力有限。

FACS和磁性细胞分选比离心要特异得多，因为这些方法利用抗体来识别目标细胞。利用FACS，细胞可根据几个抗原的表达来分离。磁性分选则于1-2个抗原，但优点不少。它的平台更为简单，成本要低得多，并且处理时间也更短。也许你正跃跃欲试，那么，你需要考虑以下四个因素。

样品组成

若你了解样品混合物的组成，则意味着实验能够很好地规划和开展。对于磁性细胞分选而言，这尤为重要，因为熟悉不同的细胞群体可帮你zui大限度提高分离的纯度和产量。比较两个样品的情况并不少见吧，比如，一个是对照，一个经过处理。处理后的样品可能有着不同比例的目标细胞，这意味着你需要调整试剂，才能达到类似的纯度。这同样适用于标志物上调或下调的情况。

阳性分选还是阴性分选？

磁性细胞分选有两种策略：阳性和阴性分选。简单地说，阳性分选就是选出想要的，而阴性分选就是选出不想要的，留下想要的。这个选择取决于你的特定需求，不过也需要考虑几个因素：

作为FACS之前的富集步骤。在处理复杂的细胞群体时，一种有效的方法是先阳性选择，再进行FACS。例如，对于低频率的目标如小鼠树突状细胞（DC），你可以用CD11c结合的磁珠来富集整个DC部分，再通过FACS分选出CD8+和CD11+亚群。

功能研究。在开展阳性分选时，分离出的细胞携带了分选用的磁珠，除非二次处理才能去除。在大多数情况下，这都不是问题。不过，如果磁珠有阻断或激活的性能，或者你已经发现阳性选择对你的实验读数有影响，那么阴性选择可能更适合。

计算纯度和产量

在你分选出细胞之后，你可能需要验证它的纯度和产量。纯度定义为收集到的目标细胞的比例，可通过流式细胞仪来分析。产量则定义为回收到的目标细胞相对于原始样品中目标细胞的比例。人们可能使用不同的方法来计算这一参数。有些人在将样品放入磁场前后计算目标细胞的数量，有些人则计算整个过程的产量。无论你使用哪种方法，它都报告为分选后目标细胞的数量/分选前目标细胞的数量。切记，不要使用细胞总数作为分母。

寻找纯度和产量之间的平衡点

磁性分选的本质是在纯度和产量之间寻找一个的平衡点。当你提高纯度，产量就会下降，反之亦然。对于阳性分选，若希望zui大限度提高纯度，你可以减少磁珠的量，或增加分离次数。若希望提高产量，则增加磁珠的量，或减少分离次数。

当然，细胞分选实验还是颇有挑战性的，希望这里讨论的tips能帮助你获得的结果。

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