猪伪狂犬GE基因抗体（PRV Ab）ELISA试剂盒欢迎选购

 猪伪狂犬GE基因抗体（PRV Ab）ELISA试剂盒欢迎选购

实验原理

本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中猪伪狂犬GE基因抗体（PRV Ab）表达。用纯化的猪伪狂犬GE基因抗原包被微孔板，制成固相抗原，可与样品中伪狂犬GE基因抗体（PRV Ab）相结合，经洗涤除去未结合的抗原和其他成分后再与HRP标记的伪狂犬GE基因抗原结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过*洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成zui终的黄色。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），与CUTOFF值相比较，从而判定标本中猪伪狂犬GE基因抗体（PRV Ab）的存在与否。

操作步骤

1.         编号：将样品对应微孔按序编号，每板应设阴性对照2孔、阳性对照2孔、空白对照1孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）

2.         加样：分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照50μl。然后在待测样品孔先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，

3.         温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。  

4.         配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用

5.         洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。

6.         加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。

7.         温育：操作同3。

8.         洗涤：操作同5。

9.         显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃

避光显色15分钟.

10.     终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。

11.     测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

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