子宫内膜间质细胞 返回列表页

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商品属性：

细胞培养步骤:

一.培养基及培养冻存条件准备:

1) 准备DMEM-H培养基(DMEM-H:GIBCO,货号12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。

2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。

3) 冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。

二. 细胞处理:

1) 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。

2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。

细胞培养操作规程：

一．培养基及培养冻存条件准备：

1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。

2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。

3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。

二．细胞处理：

1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：

方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

大鼠白介素26(IL-26)免疫试剂盒现货供应

人抗麦角蛋白(Gliadin)抗体(IgA)免疫试剂盒进口、组装

人凋亡抑制因子3(BIRC4/API3)免疫试剂盒现货供应

人Corin 免疫试剂盒进口、组装

大鼠脂酰辅A合成(ACS)免疫试剂盒现货供应

大鼠金属转运蛋白1(MTP1)免疫试剂盒进口、组装

大鼠1,4,5-三肌醇(IP3)免疫试剂盒现货供应

PBS-Tween20洗液 英文名称：PBS-Tween20 lotion 产品规格：250g

3%NaCl氨基酸脱羧对照 英文名称： 产品规格：2휈恣Հ翶䡀߾＃؇߶찌᠇ᬘ鸁ڋ⪸ÿ

子宫内膜间质细胞Bovine Rhinitis Virus (BRV)牛鼻炎病毒通用 RT-LAMP试剂盒 动物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周Donkey Anti-Guinea pig IgG/Cy7  Cy7标记的驴抗豚鼠IgG 规格: 0.1ml

Infectious Spleen and Kidney Necrosis Virus(ISKNV )传染性脾肾坏死病病毒探针法荧光定量PCR试剂盒 动物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周Lamin B Receptor  核纤层蛋白B受体抗体 规格: 0.2ml

Simian Foamy Virus(SFV)猴泡沫病毒RT-PCR试剂盒 动物病原微生物检测（科研用） 50次 低温 负20度 一年 2-4周phospho-Ephrin B(Tyr329)  磷酸化Ephrin B抗体 规格: 0.1ml

虎源性成分LAMP试剂盒 种源性检测/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周ABCB5  ATP结合蛋白家族5抗体 0.1ml

Tanapox Virus(TPV)塔那痘病毒探针法荧光定量PCR试剂盒 动物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周CD57/HNK1  髓鞘相关糖蛋白CD57抗体 规格: 0.1ml

Pseudomonas marginalis pv. marginalis边缘假单胞边缘致病变种 植物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周RNF14  环指蛋白14抗体 规格: 0.2ml

Flos buddlejae密蒙花PCR鉴定试剂盒 中药材鉴定试剂盒/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-4周Phospho-Nur77(Ser351)  磷酸化孤儿核受体蛋白Nur77抗体 规格: 0.1ml

Mud Crab Dicistrovirus (MCDV)青蟹双顺反子病毒LAMP试剂盒 动物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周PDE4A  磷酸二酯4A抗体 规格: 0.1ml

Parainfluenza Virus(PIV)副流感病毒通用探针法荧光定量RT-PCR试剂盒 动物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周phospho-IKK beta(Tyr188)  磷酸化KB抑制蛋白激β抗体 规格: 0.1ml

Semen ginkgo白果探针法PCR鉴定试剂盒 中药材鉴定试剂盒/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-4周Rabbit Anti-Avidin/Alexa Fluor 488  Alexa Fluor 488标记的兔抗亲和素 规格: 0.1ml

操作要点：

1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。

2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内*解冻，使细胞能尽快通过最易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。

3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。

4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。

5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。

6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。