小鼠滑膜间充质干细胞-上海邦景实业有限公司

货号	BJ-X97684

操作要点：

1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。

2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内*解冻，使细胞能尽快通过最易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。

3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。

4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。

5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。

6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。

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产品名称	小鼠滑膜间充质干细胞
规格	5×10⁵Cells/T25培养瓶
货号	BJ-X97684

商品属性：

名称 小鼠滑膜间充质干细胞

2.组织来源：滑膜组织

3.产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶

4.细胞简介：

小鼠滑膜间充质干细胞分离自滑膜组织；滑膜组织是位于关节腔内面的内衬结构，各种关节内疾病均会累及滑膜。而滑膜细胞是维持关节正常功能的重要组织结构，同时在各种关节疾患中也是主要病变部位。骨关节炎（OA）以关节软骨退行性变为特征，其病理改变累及关节的各个组成部分，但绝不仅局限于软骨，还包括软骨下骨、滑膜、半月板和韧带。各组成部分的病理改变相互影响，相互作用，共同加速关节的退变。滑膜细胞是构成滑膜层的最大细胞群体，是维持关节正常功能的重要组织结构，它包埋在颗粒状无定性的基质中，基质内有分散的纤维分布。滑膜由A型（巨噬样滑膜细胞）、B型（成纤维样滑膜细胞）以及C型（树突细胞样滑膜细胞）细胞组成。滑膜细胞主要功能：①滑膜细胞产生润滑液成分，并且与关节腔的吸收和血液/润滑液交换有关；②滑膜细胞增生，表现为不依赖于支持物生长，并且分泌大量的效应分子来促进炎症和关节损坏；③是自身自分泌和旁分泌网络中效应因子的一部分。

5.方法简介：

()实验室分离的小鼠滑膜间充质干细胞采用胶原酶消化法和低密度接种法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

6.质量检测：

()实验室分离的小鼠滑膜间充质干细胞经CD29、CD44免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

7.培养信息：

培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

产品货号CM-M236

换液频率每2-3天换液一次

生长特性贴壁

细胞形态成纤维细胞样

传代特性可传2-3代

消化液0.25%

培养条件气相：空气，95%；CO2，5%

细胞培养步骤:

一.培养基及培养冻存条件准备:

1) 准备DMEM-H培养基(DMEM-H:GIBCO,货号12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。

2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。

3) 冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。

二. 细胞处理:

1) 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。

2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。

图片13.jpg

细胞培养操作规程：

一．培养基及培养冻存条件准备：

1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。

2）培养条件：气相：空气，95%；二氧化碳，5%。温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。

3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。

二．细胞处理：

1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：

方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

大鼠NAD(P)H脱氢(醌)1(NQO1)免疫试剂盒现货供应

阪崎杆菌显色培养基英文名称：Enterobacter Sakazakii Chromogenic Medium 产品规格：1000ml

液体大豆酪蛋白消化物培养基英文名称：SoybeanCasein Digest Medium 产品规格：250g

猪葡萄糖转运蛋白2(GLUT2)免疫试剂盒现货供应

小鼠溶菌(LZM)免疫试剂盒*直销

小鼠γ突触核蛋白(SNCG)免疫试剂盒*直销

兔溶菌(LZM)免疫试剂盒进口、分装

人血管内皮抑素抗휈恣

小鼠滑膜间充质干细胞Mycosphaerella gibsonii松针褐枯病PCR试剂盒植物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次低温负20度一年 2-3周BBC3/PUMA p53正向细胞凋亡调控因子抗体规格: 0.1mlMouse Anti-rabbit IgG/PE-CY5 PE-CY5标记的小鼠抗兔IgG 规格: 0.1ml

Fructus citri sarcodactylis佛手PCR鉴定试剂盒中药材鉴定试剂盒/定做种属检测试剂盒 50次低温负20度一年 2-4周phospho-NFKB p65(Thr254) 磷酸化细胞核因子抗体规格: 0.1mlCDC2L6 细胞分裂周期2样蛋白激6抗体规格: 0.2ml

Human Immunodeficiency Virus 1(HIV-1)人免疫缺陷病毒I型通用RT-LAMP试剂盒动物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次低温负20度一年 2-3周CNKSR1 Ras激抑制因子连接增强蛋白1抗体规格: 0.2mlCystatin A 胱抑素A/半胱蛋白抑制剂A抗体规格: 0.2ml

Flavobacterium meningosepticum脑膜炎黄杆探针法荧光定量PCR试剂盒动物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次低温负20度一年 2-3周SGCB/SGC 肌聚多糖-β抗体规格: 0.1mlPhospho-NMDAR2B (Tyr1474) 磷酸化谷受体2B抗体规格: 0.1ml

Semen pharbitidis牵牛子染料法PCR鉴定试剂盒中药材鉴定试剂盒/定做种属检测试剂盒 50次低温负20度一年 2-4周PSMD6/P44S10 蛋白调解因子6抗体规格: 0.2mlRabbit Anti-Bovine IgM/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555标记的兔抗牛IgM 规格: 0.1ml

Campylobacter fetus subsp. Venerealis胎儿弯曲杆性病亚种LAMP试剂盒动物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次低温负20度一年 2-3周CEACAM19/CEAL1 胚抗原相关细胞粘附分子19抗体规格: 0.2mlphospho-PIK3R1(Tyr467) 磷酸化磷脂酰肌醇激抗体规格: 0.1ml

Clostridium sordellii索氏梭状芽孢杆探针法荧光定量PCR试剂盒动物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次低温负20度一年 2-3周AX2R/LOC389289 膜粘连蛋白2受体抗体规格: 0.2mlANKRD11 锚蛋白重复结构域蛋白11抗体规格: 0.2ml

Folium isatidis 大青叶LAMP鉴定试剂盒中药材鉴定试剂盒/定做种属检测试剂盒 50次低温负20度一年 2-4周plant lectin B4/IB4 植物凝集素IB4 0.2mlHLX1 同源异型盒基因HLX1蛋白抗体规格: 0.2ml

Histoplasma farciminosum假皮疽组织胞浆LAMP试剂盒动物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次低温负20度一年 2-3周Cathepsin K 组织蛋白K抗体规格: 0.1mlAggrecan1 软骨蛋白聚糖抗体规格: 0.1ml

Cowdria ruminantium反刍兽考德里氏体探针法荧光定量PCR试剂盒动物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次低温负20度一年 2-3周phospho-PRKCQ(Ser695) 磷酸化蛋白激C theta抗体规格: 0.1mlNCAM2 神经细胞粘附分子2抗体规格: 0.2ml