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货号 | BJ-X97692 |
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产品名称 | |
规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 |
货号 | BJ-X97692 |
商品属性:
名称 脉络膜黑色素细胞 2.组织来源:脉络膜组织 3.产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶 4.细胞简介: 人脉络膜黑色素细胞分离自眼球脉络膜组织;脉络膜在视网膜和巩膜之间,含有丰富血管和色素细胞,对外力冲击的耐受性较视网膜差,当眼球受到从前面来的外力的冲击作用通过玻璃体传到后极部时,坚硬的巩膜在其外面又有抵抗作用,使脉络膜在内外两种作用夹攻下而发生破裂和出血。脉络膜呈暗褐色,围绕视神经乳头部有照膜,为青绿色带金属光泽的三角形区。脉络膜是眼球中膜的后2/3处的薄膜,由纤维组织、小血管和毛细血管组成,软而薄,棕红色,在巩膜和视网膜之间,续连于睫状体后方。脉络膜的血循环营养视网膜外层,其含有的丰富色素起遮光暗房作用。主要功能是营养视网膜外层及玻璃体,并有遮光作用,使反射的物象清楚。同时对视觉系统起保护作用,对整个视觉神经有调节作用。续连于睫状体后方,含丰富的血管和色素细胞,有营养和遮光作用。 5.方法简介: ()实验室分离的人脉络膜黑色素细胞先用消化、后-胶原酶混合消化结合专用培养基筛选法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。 6.质量检测: ()实验室分离的人脉络膜黑色素细胞经Dopa染色检测,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 7.培养信息: 培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 产品货号CM-H239 换液频率每2-3天换液一次; 生长特性贴壁 细胞形态长梭形 传代特性可传1-2代 消化液0.25% 培养条件气相:空气,95%;CO2,5% |
细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1) 准备DMEM-H培养基(DMEM-H:GIBCO,货号12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。
2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3) 冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二. 细胞处理:
1) 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
大鼠4-羟基壬烯酸(HNE)免疫试剂盒现货供应
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脉络膜黑色素细胞Porcine Torque Teno Virus(PTTV)猪细环病毒LAMP试剂盒 动物病原微生物检测(科研用) 50次 低温 负20度 一年 2-4周IL-10 白细胞介素-10抗体 规格: 0.1mlVimentin 波形蛋白抗体 规格: 0.1ml
Ostertagia ostertagi奥斯特奥斯特线虫LAMP试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周VP2 重组猪细小毒VP2蛋白抗体 规格: 0.2mlPCNA [Proliferation Marker] 增细胞核抗原抗体 规格: 0.1ml
Haemophilus ducreyi杜克雷嗜血杆探针法荧光定量PCR试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周beta-Amyloid(1-28) β淀粉样肽(1-28)抗体 规格: 0.1mlPhospho-IKK alpha/IKK beta (Ser180/Ser181) 磷酸化KB抑制蛋白激α/β抗体 规格: 0.1ml
Endoconcha sepiae海螵蛸染料法PCR鉴定试剂盒 中药材鉴定试剂盒/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-4周SAMD9 SAMD9蛋白抗体 规格: 0.2mlRabbit Anti-Avidin/PE-CY5 PE-CY5标记的兔抗亲和素 规格: 0.1ml
Red Sea Bream Iridovirus(RSIV)真鲷虹彩病毒LAMP试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周Phospho-PLCG2(Tyr1217) 磷酸化磷酯Cγ2抗体 规格: 0.1mlANGEL2 ANGEL2蛋白抗体 规格: 0.2ml
Equine Herpesvirus 1 (EHV-1)马疱疹病毒1型探针法荧光定量PCR试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周KLK10 激肽释放10抗体 规格: 0.1mlPKA/PKAcat/PKACB 蛋白激A抗体 规格: 0.1ml
Caulis spatholobi鸡血藤染料法PCR鉴定试剂盒 中药材鉴定试剂盒/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-4周ATP6IP2 ATPH+转运溶体辅助蛋白2抗体 规格: 0.2mlARRDC2 抑制蛋白结构域蛋白2抗体 规格: 0.2ml
Nocardia farcinica皮诺卡LAMP试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周Maltose Binding Protein/MBP 麦芽糖结合蛋白抗体 0.2mlKLK5 激肽释放5抗体 规格: 0.1ml
Transmissible Gastroenteritis Virus(TGEV)猪传染性胃肠炎病毒探针法荧光定量RT-PCR试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周CCL5/RANTES T细胞特异性趋化因子抗体 规格: 0.1mlNF1/Neurofibromin 1 1型神经纤维瘤抗体 规格: 0.1ml
Dermanyssus gallinae鸡皮刺螨染料法荧光定量PCR试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周Rabbit Anti-chicken IgM/Cy5 Cy5标记的兔抗鸡IgM 规格: 0.1mlACADS 酰基辅A脱短链抗体 0.2ml
操作要点:
1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。
2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内*解冻,使细胞能尽快通过最易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。
4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。
5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。
6)第二天观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代,细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
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