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货号 | BJ-X97704 |
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细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1) 准备DMEM-H培养基(DMEM-H:GIBCO,货号12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。
2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3) 冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二. 细胞处理:
1) 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
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产品名称 | |
规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 |
货号 | BJ-X97704 |
商品属性:
名称 大鼠阴道平滑肌细胞 2.组织来源:阴道组织 3.产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶 4.细胞简介: 大鼠阴道平滑肌细胞分离自阴道组织;阴道位于膀胱、尿道和直肠之间,是一个富有弹性的管状器官。它在人类生殖过程中具有多种生理功能,是连接子宫与外阴的通道,是排出月经血、娩出婴儿的必经之路,也是一个重要的性交器官。阴道壁按组织学由外到内分三层,即黏膜层、肌层和外膜。平滑肌,是非横纹肌的肌肉组织。分布在人体动脉和静脉血管壁、膀胱、子宫、男性和女性生殖道、消化道、呼吸道、眼睛的睫状肌和虹膜。阴道平滑肌分离自阴道壁肌层组织,平滑肌细胞原代分离培养3天后,可见细胞贴壁伸展,细胞形态大小不一,呈梭形、不规则形、三角形或扇形,核卵圆形、居中;2周后细胞汇合,多数细胞伸展呈长梭形,胞浆丰富,有分枝状突起,细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长,高低起伏;细胞密度低时,常交织成网状;密度高时,则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快,4-6天即可汇合,并保持上述形态学特征和生长特点。 5.方法简介: ()实验室分离的大鼠阴道平滑肌细胞采用胶原酶消化法结合差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。 6.质量检测: ()实验室分离的大鼠阴道平滑肌细胞经α-SMA免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 7.培养信息: 培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 产品货号CM-R300 换液频率每2-3天换液一次 生长特性贴壁 细胞形态成纤维细胞样 传代特性可传5代左右;3代以内状态最佳 消化液0.25% 培养条件气相:空气,95%;CO2,5% |
细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
操作要点:
1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。
2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内*解冻,使细胞能尽快通过最易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。
4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。
5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。
6)第二天观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代,细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
鲑鱼促胰液素/胰泌素(SCT)免疫试剂盒进口、分装
大鼠热休克蛋白27(HSP-27)免疫试剂盒进口、分装
大鼠对氧磷1(PON1)免疫试剂盒*直销
大象孕激素/孕酮(PROG)免疫试剂盒*直销
半固体琼脂 英文名称:Semi-solid agar 产品规格:250g
D-发酵管(枯草芽孢杆菌) 英文名称: 产品规格:20支
改良HC琼脂 英文名称:HC Agar,Modified 产品规格:250g
猪凝血抗凝血复合物(TAT)免疫试剂盒进口、分装
小鼠嗜环蛋白/亲环素A(CyPA)免疫试剂盒
大鼠阴道平滑肌细胞Fonsecaea pedrosoi佩氏着色霉探针法荧光定量PCR试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周phospho-SYT6(Thr418) 磷酸化突触蛋白6抗体 规格: 0.1ml
Fructus rubi覆盆子LAMP鉴定试剂盒 中药材鉴定试剂盒/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-4周Proteasome 20S beta 3 蛋白体PSMβ3抗体 规格: 0.2ml
Trichoderma spp.木霉属通用LAMP试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 1-2周VIP receptor 2/VPAC2 苷酸环化激活肽受体-II/管活性肠肽受体-II抗体 规格: 0.1ml
Mycobacterium microti田鼠分枝杆探针法荧光定量PCR试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周Batroxobin 蛇毒蛋白巴曲抗体 规格: 0.2ml
Albugo tragopogi向日葵白锈病PCR试剂盒 植物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周Mouse Anti-rat IgG/PE-Cy7 PE-Cy7标记的小鼠抗大鼠IgG 规格: 0.1ml
猕猴源性成分LAMP试剂盒 种源性检测/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周SLT/SLT-IIe/O139 猪水素(O139)菌体蛋白抗体 规格: 0.2ml
Piscirickettsia salmonis鲑鱼立克次氏体探针法荧光定量PCR试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周MTNR1B 褪黑素受体1B抗体 规格: 0.1ml
Apple Stem Grooving Virus(ASGV)苹果茎沟病毒RT-PCR试剂盒 植物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周eIF6/ITGB4BP β4整合素结合蛋白抗体 规格: 0.1ml
小鼠源性成分LAMP试剂盒 种源性检测/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周Donkey Anti-Guinea pig IgG/PE-CY5 PE-CY5标记的驴抗豚鼠IgG 规格: 0.1ml
Group A Streptococcus spp.(GAS) 链球A组LAMP试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周CD54/ICAM-1 细胞间粘附分子-1抗体 规格: 0.1ml
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