小鼠神经少突胶质前体细胞-上海邦景实业有限公司

货号	BJ-X97716

细胞培养步骤:

一.培养基及培养冻存条件准备:

1) 准备DMEM-H培养基(DMEM-H:GIBCO,货号12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。

2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。

3) 冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。

二. 细胞处理:

1) 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。

2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。

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产品名称	小鼠神经少突胶质前体细胞
规格	5×10⁵Cells/T25培养瓶
货号	BJ-X97716

商品属性：

名称 小鼠神经少突胶质前体细胞

2.组织来源：脑组织

3.产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶

4.细胞简介：

小鼠神经少突胶质前体细胞分离自脑皮层组织；大脑分左右两个半球，大脑皮质（灰质）覆盖着每个大脑半球的大部分，它是神经元胞体集中的地方。内部则是由神经纤维或髓鞘构成的白质。少突胶质细胞分布于中枢神经系统，在银浸染标本中，少突胶质细胞比星状胶质细胞小，其突起也较小而少，呈珠状，故被称为少突胶质细胞或寡突胶质细胞。少突胶质细胞（oligodendrocyte）是中枢神经系统（CNS）的成髓鞘神经胶质细胞，其发育要经历少突胶质细胞祖细胞、前少突胶质细胞祖细胞、未成熟和成熟少突胶质细胞等阶段。有学者将少突胶质细胞按其发育程度和形态分为三型。但是，细胞发育是一个连续的过程，其形态、表达产物和功能的演变没有严格的界限，因此，其分类是相对的。这三型分别为：Ⅰ型少突胶质细胞又称前O2A（pre-O2A progenitor cell）。细胞呈圆形，表面光滑，直径约3μm，体外混合培养时成簇生长在星形胶质表面，具有很强的分裂增殖潜力，表达神经节苷脂GM1、波形蛋白和多唾液酸—神经粘附分子（polysialic acid-neural cell adhesion molecule，PSA-NCAM）等。Ⅱ型少突胶质细胞胞体常有双极或三极突起，极少数为单极突起，直径约7μm，有一定的分裂增殖能力。体外培养时为双潜能细胞，既可分化为少突胶质细胞又可分化为Ⅱ型星形胶质，故又称为少突胶质细胞-Ⅱ型星形胶质祖细胞（oligodendrocyte-type-2 astrocyte progenitor cell，O2A）。O2A除表达GM1和波形蛋白外还表达神经节苷脂GD3和GQ（淋巴杂交瘤株A2B5产生GQ的抗体），故常用A2B5抗体标记O2A。Ⅲ型少突胶质细胞不再具有分裂增殖能力，为分裂终期细胞。直径约10μm。根据其形成髓鞘的能力，又分为不成熟的和成熟的两类少突胶质细胞。不成熟的OL胞体常伸出4～5条较粗大突起，表面还残留有A2B5标记物，同时也表达O1-O4抗原，无形成髓鞘的能力。成熟的少突胶质细胞突起有如蜘蛛网，大量表达半乳糖脑苷脂（galactocerebro side，GC）、蛋白脂蛋白（proteio lipid protein，PLP）、髓鞘碱性蛋白（myelin basic protein，MBP）等，有对轴突髓鞘化的能力。体外培养的少突胶质细胞前体细胞（简称少突胶质细胞前体细胞）包括前O2A和O2A和未成熟少突胶质细胞，前两者具有增殖能力。

5.方法简介：

()实验室分离的小鼠神经少突胶质细胞采用消化、混合细胞营养缺失培养、摇床振荡结合差速贴壁法并通过专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×105cells/瓶。

6.质量检测：

()实验室分离的小鼠神经少突胶质前体细胞经A2B5免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

7.培养信息：

包被条件PLL（0.1mg/ml）

培养基含B-27 Supplement、PDGF、bFGF、Penicillin、Streptomycin等

产品货号CM-M308

换液频率每2天半量换液1次

生长特性贴壁

细胞形态双极、多极形

传代特性不传代，不增值，存活1-2周

消化液0.25%

培养条件气相：空气，95%；CO2，5%

图片13.jpg

细胞培养操作规程：

一．培养基及培养冻存条件准备：

1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。

2）培养条件：气相：空气，95%；二氧化碳，5%。温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。

3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。

二．细胞处理：

1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：

方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

操作要点：

1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。

2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内*解冻，使细胞能尽快通过最易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。

3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。

4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。

5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。

6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。

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小鼠神经少突胶质前体细胞Radix et caulis acanthopanacis senticosi刺五加PCR鉴定试剂盒中药材鉴定试剂盒/定做种属检测试剂盒 50次低温负20度一年 2-4周Rabbit Anti-Goat IgM/HRP 辣根过氧化物标记的兔抗羊IgM 规格: 0.1mlCDCP1/CD318 CD318抗体规格: 0.2ml

Toxophasma gondii刚地弓形虫LAMP试剂盒动物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次低温负20度一年 2-3周Phospho-HDAC4(Ser246)/HDAC5(Ser259)/HDAC7(Ser155) 磷酸化组蛋白去乙酰化4/5/7抗体规格: 0.1mlCA153/EMA/Mucin 1 相关抗原抗体规格: 0.1ml

Influenza Virus A甲型流感（）病毒M1亚型探针法荧光定量RT-PCR试剂盒动物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次低温负20度一年 2-3周CXCL15/Lungkine 趋化因子CXCL15抗体规格: 0.2mlNAIF1 protein 核凋亡诱导因子蛋白1 规格: 0.2ml

Semen pharbitidis牵牛子染料法PCR鉴定试剂盒中药材鉴定试剂盒/定做种属检测试剂盒 50次低温负20度一年 2-4周NALP2/PAN1/PYPAF2 富含亮重复结构域蛋白2抗体规格: 0.1mlPDGF Receptor beta/PDGFRB 小板源性生因子受体B抗体(PDGFRβ) 规格: 0.1ml

Capripox Virus羊痘病毒LAMP试剂盒动物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次低温负20度一年 2-3周GST tag/GSTM1 GST标签蛋白抗体规格: 0.1mlATF4/CREB-2 活化转录因子4抗体规格: 0.1ml

Salmonella typhi伤寒沙门氏探针法荧光定量PCR试剂盒动物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次低温负20度一年 2-3周Collagen IV 抗IV型胶原抗体规格: 0.1mlChemerin/TIG2 视黄酸受体应答蛋白2抗体规格: 0.1ml

Cortex phellodendri黄柏探针法PCR鉴定试剂盒中药材鉴定试剂盒/定做种属检测试剂盒 50次低温负20度一年 2-4周ETFB 电子转移黄素蛋白β肽/黄素蛋白抗体规格: 0.2mlHMGCS2 三羟基三甲基辅A合成2抗体规格: 0.2ml

Boheliridovirus(BIV)饰纹汀蛙虹彩病毒LAMP试剂盒动物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次低温负20度一年 2-3周CD146/MCAM 黑色素瘤细胞粘附分子CD146抗体规格: 0.1mlCytochrome P450 2D1 YP2D1抗体规格: 0.1ml

Avian Leukosis Virus(ALV)禽白血病病毒通用探针法荧光定量RT-PCR试剂盒动物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次低温负20度一年 2-3周Rabbit Anti-Avidin/Cy5.5 Cy5.5标记的兔抗亲和素规格: 0.1mlMAdCAM1 粘膜细胞粘附分子1抗体规格: 0.2ml

European Brown Hare Syndrome Virus(EBHSV)欧洲棕色野兔综合症病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒动物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次低温负20度一年 2-3周PCK2 磷酸羧化2抗体规格: 0.2mlPhospho-MAP3K8/Tpl2 (Thr290) 磷酸化丝裂原活化蛋白激激8抗体规格: 0.1ml