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货号 | BJ-X97628 |
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细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1) 准备DMEM-H培养基(DMEM-H:GIBCO,货号12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。
2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3) 冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二. 细胞处理:
1) 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
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产品名称 | |
规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 |
货号 | BJ-X97628 |
商品属性:
名称 小鼠全骨髓细胞 2.组织来源:骨髓 3.产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶 4.细胞简介: 小鼠全骨髓细胞分离自骨髓;骨髓是机体的造血组织,位于身体的许多骨骼内。成年动物的骨髓分两种:红骨髓和黄骨髓。红骨髓能制造红细胞、血小板和各种白细胞。血小板有止血作用,白细胞能杀灭与抑制各种病原体,包括细菌、病毒等;某些淋巴细胞能制造抗体。因此,骨髓不但是造血器官,它还是重要的免疫器官。骨髓是存在于长骨(如肱骨、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨质间的网眼中,是一种海绵状的组织,能产生血细胞的骨髓略呈红色,称为红骨髓。出生时,红骨髓充满全身骨髓腔,随着年龄增大,脂肪细胞增多,相当部分红骨髓被黄骨髓取代,最后几乎只有扁平骨骨髓腔中有红骨髓。全骨髓细胞即骨髓内除红细胞外的全部细胞。 5.方法简介: ()实验室分离的小鼠全骨髓细胞细胞采用冲洗骨髓、红细胞裂解法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。 6.质量检测: ()实验室分离的小鼠全骨髓细胞经过检测,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 7.培养信息: 培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 产品货号CM-M211 换液频率每2-3天换液一次 生长特性悬浮 细胞形态圆形 传代特性不增殖;不传代 消化液0.25% 培养条件气相:空气,95%;CO2,5% |
细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
操作要点:
1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。
2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内*解冻,使细胞能尽快通过最易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。
4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。
5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。
6)第二天观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代,细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
大鼠母亲DPP同源物4(Smad 4)免疫试剂盒现货供应
小鼠热休克蛋白40(Hsp-40)免疫试剂盒进口、组装
小鼠白介素31(IL-31)免疫试剂盒进口、组装
兔过氧化物体增殖因子活化受体γ(PPAR-γ)免疫试剂盒进口、组装
人腺病毒IgG(ADV-IgG)免疫试剂盒现货供应
人绿脓杆菌外毒素A(PEA)免疫试剂盒进口、组装
人核因子κB抑制物激α(IKK-α)免疫试剂盒现货供应
人γ干扰素诱导蛋白16/p16(IFI16/p16)免疫试剂盒进口、组装
犬促肾上腺皮质激素(ACTH)免疫试剂盒*直ows\system32\EhStorShell.dll
小鼠全骨髓细胞Swine influenza(SIV)猪流感病毒通用型PCR试剂盒 动物病原微生物检测(科研用) 50次 低温 负20度 一年 2-4周Cyclin E2 周期素E2抗体 规格: 0.2mlRabbit Anti-human IgG F(ab')2/HRP 辣根过氧化物标记的兔抗人IgG F(ab')2 规格: 0.1ml
Streptococcus canis犬链球LAMP试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周SARS putative orflab polyprotein 抗体 规格: 0.2mlTIP30 TIP30蛋白抗体 规格: 0.2ml
Monkey Pox Virus(MPV)猴痘病毒探针法荧光定量PCR试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周phospho-IKK gamma (Ser85) 磷酸化KB抑制蛋白激γ抗体 规格: 0.1mlNCKAP1 膜相关的蛋白质HEM2抗体 规格: 0.2ml
Radix platycodonis桔梗染料法PCR鉴定试剂盒 中药材鉴定试剂盒/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-4周BMP5 骨形态发生蛋白5抗体 规格: 0.1mlATH III 抗凝3抗体 规格: 0.2ml
Cyprinid Herpesvirus(CyHV)鲤疱疹病毒通用LAMP试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周APC5 细胞分裂周期蛋白5抗体 规格: 0.2mlFAM98B FAM98B蛋白抗体 规格: 0.2ml
Schistosoma incognitum不明血吸虫探针法荧光定量PCR试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周Endothelial lipase 内皮脂肪抗体 规格: 0.2mlSAMD7 SAMD7蛋白抗体 规格: 0.2ml
Sanguis draxonis血竭探针法PCR鉴定试剂盒 中药材鉴定试剂盒/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-4周SUPT16H/CDC68 染色体特异性转录延伸因子抗体 规格: 0.2mlHIF-1 Alpha 缺氧诱导因子1α 抗体HIF-1α 规格: 0.1ml
Isospora spp.等孢球虫通用LAMP试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周SHC3 SH2结构域蛋白C3抗体 规格: 0.2mlADAMTS10 整合素样金属蛋白与凝10型抗体 规格: 0.1ml
Candida glabrata光滑念珠探针法荧光定量PCR试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周Collagen III 抗Ⅲ型胶原抗体 规格: 0.1mlDonkey Anti-human IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488标记的驴抗人IgG 规格: 0.1ml
Pichinde virus(PARV)皮钦德病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周C20orf195 20号染色体开放阅读框195抗体 规格: 0.2mlATG16L2 自噬体ATG16L2蛋白抗体 规格: 0.2ml
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