大鼠表皮角化上皮细胞-上海邦景实业有限公司

货号	BJ-X97636

操作要点：

1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。

2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内*解冻，使细胞能尽快通过最易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。

3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。

4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。

5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。

6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。

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产品名称	大鼠表皮角化上皮细胞
规格	5×10⁵Cells/T25培养瓶
货号	BJ-X97636

商品属性：

名称 大鼠表皮角化上皮细胞

2.组织来源：皮肤组织

3.产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶

4.细胞简介：

大鼠表皮角化细胞分离自皮肤组织；表皮位于动物皮肤的外层，由胚胎时期外胚层形成，具有抗摩擦和抗损伤的作用。表皮是皮肤的浅层结构，由复层扁平上皮构成。从基底层到表面可分为五层，即基底层、棘层、颗粒层、透明层和角质层。表皮角化细胞（KC）是构成表皮的主要细胞成分，在体内处于不断增殖过程中，分裂的角化细胞主要位于其基底层，少数位于棘细胞层。随着向表层的推移，细胞的分化程度逐渐增加，并丧失分裂活性。

5.方法简介：

()实验室分离的大鼠表皮角化上皮细胞先消化、后-胶原酶混合消化法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

6.质量检测：

()实验室分离的大鼠表皮角化上皮细胞经PCK免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

7.培养信息：

包被条件鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

产品货号CM-R215

换液频率每2-3天换液一次

生长特性贴壁

细胞形态上皮细胞样

传代特性可传1-3代左右；2代以内状态最佳

消化液0.25%

培养条件气相：空气，95%；CO2，5%

细胞培养步骤:

一.培养基及培养冻存条件准备:

1) 准备DMEM-H培养基(DMEM-H:GIBCO,货号12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。

2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。

3) 冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。

二. 细胞处理:

1) 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。

2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。

图片13.jpg

细胞培养操作规程：

一．培养基及培养冻存条件准备：

1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。

2）培养条件：气相：空气，95%；二氧化碳，5%。温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。

3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。

二．细胞处理：

1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：

方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

大鼠抗心磷脂抗体IgA(ACA-IgA)免疫试剂盒现货供应

人次黄氧化免疫试剂盒现货供应

人A激PRKA锚定蛋白12(Akap12)免疫试剂盒进口、组装

绵羊口蹄疫(FMDV)抗体(IgM)免疫试剂盒进口、分装

大鼠胰蛋白原激活肽(TAP)免疫试剂盒进口、组装

大鼠含免疫球蛋白样环和上皮生长因子样域酪激1(Tie-1)免疫试剂盒现货供应

海狮睾酮(T)免疫试剂盒现货供应

煌绿乳糖胆盐肉汤（BGLB）英文名称：Brilliant Green Lactose Bile Broth 产品规格：250g

大鼠表皮角化上皮细胞Alfalfa Mosaic Virus(AMV)苜蓿花叶病毒RT-PCR试剂盒植物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次低温负20度一年 2-3周PMPCB 线粒体导肽水解β抗体规格: 0.2mlRabbit anti-mouse Kappa light chain/PE-Cy3 PE-Cy3标记的兔抗小鼠k链规格: 0.1ml

甲型流感（）H5/H7/H9亚型三重探针法荧光定量RT-PCR试剂盒（无）定做种属检测试剂盒 50次低温负20度一年 2-3周Phospho-Smad1/5(Ser463/465) 磷酸化细胞信号转导分子Smad-1/5抗体规格: 0.1mlrHPV 重组人瘤毒抗体规格: 0.2ml

Influenza Virus A甲型流感（）病毒H7亚型RT-LAMP试剂盒动物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次低温负20度一年 2-3周Phospho-Insulin Receptor Beta(Tyr1345) 磷酸化胰岛素受体β抗体规格: 0.1mlKLH 蓝蛋白抗体规格: 0.2ml

乳酸杆探针法荧光定量PCR试剂盒动物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次低温负20度一年 2-3周EPHA10 酪蛋白激受体A10抗体规格: 0.1mlRabbit Anti-human IgG/Bio 标记的兔抗人IgG 规格: 0.1ml

Fructus toosendan川楝子染料法PCR鉴定试剂盒中药材鉴定试剂盒/定做种属检测试剂盒 50次低温负20度一年 2-4周REG4/RELP 再生基因蛋白4抗体规格: 0.2mlPhospho-TAK1(Ser192) 磷酸化转化生因子β活化激1 规格: 0.1ml

Parechovirus(PeV) 双埃柯病毒LAMP试剂盒动物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次低温负20度一年 2-3周CDX1 尾侧型同源转录因子1抗体规格: 0.2mlIQCK IQCK蛋白抗体规格: 0.2ml

Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus Europe Strain (PRRSV Europe)猪生殖与呼吸综合症病毒欧洲株探针法荧光定量RT-PCR试剂盒动物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次低温负20度一年 2-3周phospho-RGS19(Ser151) 磷酸化G蛋白信号转导调节因子19抗体规格: 0.1mlE-cadherin/CD324 上皮钙粘附分子抗体规格: 0.1ml

Rhizoma wenyujin concisum片姜黄探针法PCR鉴定试剂盒中药材鉴定试剂盒/定做种属检测试剂盒 50次低温负20度一年 2-4周alpha-L-arabinofuranosidase 果桃α-L-阿拉伯呋喃糖苷抗体规格: 1mlMTA1 瘤转移相关蛋白1抗体规格: 0.2ml

Oliveros virus(OLVV)奥利华斯病毒RT-LAMP试剂盒动物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次低温负20度一年 2-3周Claudin 6 紧密连接蛋白6抗体规格: 0.2mlGFR Alpha-1 GDNF家族受体α-1抗体规格: 0.1ml

Bonamia spp.包纳米虫属通用探针法荧光定量PCR试剂盒动物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次低温负20度一年 2-3周Rabbit Anti-mouse IgG-Fc/Cy5 Cy5标记的兔抗小鼠IgG-Fc 规格: 0.1mlRabbit anti-Goat IgM whole serum 兔抗羊IgM抗清规格: 1ml