多胺氧化酶(PAO)测试盒比色法活性计算

测定原理：

PAO催化多胺氧化产生过氧化氢，在过氧化物酶存在的条件下与底物显色，在550nm下有特征吸收峰，通过测定吸光值增加速率来反映PAO活性。

PAO活性计算：

1、按样本蛋白浓度计算：

单位定义：每mg组织蛋白在每mL反应体系中每分钟A550变化0.001为一个酶活力单位。

PAO（U/mg prot）＝ΔA×V反总÷（V样×Cpr）÷0.001÷T =333.33×ΔA÷Cpr

2、按样本鲜重计算：

单位定义：每g组织在每mL反应体系中每分钟A550变化0.001为一个酶活力单位。

PAO（U/g 鲜重）＝ΔA×V反总÷(W× V样÷V样总)÷0.001÷T =333.33×ΔA÷W

3、按细菌或细胞密度计算：

单位定义：每1万个细菌或细胞在每mL反应体系中每分钟A550变化0.001为一个酶活力单位。

PAO（U/104 cell）＝ΔA×V反总÷(500×V样÷V样总)÷0.001÷T =0.667×ΔA

4. 按液体体积计算

单位的定义：每mL液体样本在每mL反应体系中每分钟A550变化0.001为一个酶活力单位。

PAO（U/mL）=ΔA×V反总÷V样÷0.001÷T =333.33×ΔA

V反总：反应体系总体积，0.2mL；V样：加入样本体积，0.02 mL；V样总：加入提取液体积，1 mL；T：反应时间，30 min；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量，g；500：细菌或细胞总数，500万。