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细胞冻存及复苏操作步骤2023/9/11
细胞冻存及复苏操作步骤：一、冻存1、消化细胞，将细胞悬液收集至离心管中。2、1000rpm离心10分钟，弃上清液。3、沉淀加含保护液的培养，计数，调整至5×106/ml左右。4、将悬液分至冻存管中，每...
PCR反应循环参数注释2023/9/8
循环参数:1.预变性模板DNAwan全变性与PCR酶的wan全激活对PCR能否成功至关重要，建议加热时间参考试剂说明书，一般未修饰的Taq酶激活时间为两分钟。2.变性步骤循环中一般95℃，30秒足以使...
单克隆抗体的性质鉴定方法2023/8/28
当获得多个杂交瘤细胞株时，要了解哪一株是zui适用的，则一定要通过各种鉴定。分析常见的方法有：（一）Ig类型测定通常以免抗小鼠Ig类及亚类抗体与培养液中单克隆抗体按双向琼脂扩散法进行测定，确定其Ig类...
胎牛血清质控外观判定要素2023/8/21
拿到血清，zui先接触的是血清外观，对于缺少细胞培养经验的人来说，外观的判断尤为重要。1、颜色根据血红蛋白含量的不同，胎牛血清可表现出黄色或红色，我国的细胞培养用血清标准是不高于20mg/dl，实际上...
大鼠子宫内膜基质细胞操作要点2023/8/17
大鼠子宫内膜基质细胞操作要点：1、将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。2、将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37...
荧光定量PCR扩增曲线四个时期2023/8/7
扩增曲线是描述PCR动态进程的曲线，以循环数为横坐标，以反应过程中实时荧光信号强度为纵坐标。理论上PCR过程中反应产物是以指数增长的，但随着PCR循环数的增加，DNA聚合酶失活、dNTP和引物枯竭、反...
抗原几个基本条件2023/8/1
构成抗原的基本性质，一般须具备如下几个基本条件：异源物质、有一定的分子量、有较复杂的分子结构、特异性。1、异源物质：在正常情况下，只有异体物质进入体内才可能具有免疫原性。一般说，这种异体物质必须是动物...
ELISA样品处理和移液技术注意事项2023/7/17
试剂和样品处理不当或储存不正确会影响下游分析，因为不同的缓冲剂和试剂会有不同的储存要求。例如，有些必须储存在冰箱里，有些在室温下，有些用感光罩（如铝箔）。如果有计划在未来的实验中使用相同的样品，那么应...
探究酶的特性实验材料及选择鉴定的试剂2023/7/10
酶的特性包括酶的高效性、酶的专一性、作用条件较温和（温度和PH对酶的活性有影响）。常见的实验材料及选择鉴定的试剂：1、H2O2：过氧化氢在FeCl3和过氧化氢酶的催化及高温条件下分解，可通过观察气泡的...
小鼠骨形成蛋白（BMPs）ELISA试剂盒实验注意事项2023/6/26
小鼠骨形成蛋白（BMPs）ELISA试剂盒实验注意事项：1、试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。2、实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。3、...
大鼠肝细胞培养基本条件2023/6/12
大鼠肝细胞培养基本条件：1、合适的细胞培养基合适的小鼠源细胞培养基是体外细胞生长增殖的重要的条件之一，培养基不仅提供细胞营养和促使细胞生长增殖的基础物质，而且还提供培养细胞生长和繁殖的生存环境。2、优...
贴壁细胞传代参考2023/6/5
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：1.弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-...
血清购买注意点2023/5/29
血清的质量，种类及使用的浓度都有可能影响细胞的生长，而不同批次的血清支持细胞生长的能力也不同，尤其是对克隆细胞的生长，某些批次血清可能含有毒性或抑制细胞生长的物质。因此，在购买大量血清之前，必须对血清...
ELISA试验包被各条件选择介绍2023/5/23
1.包被抗原的选择包被抗原可分为天然蛋白、重组蛋白和小分子抗原三大类。天然蛋白需经纯化才能用直接吸附法包被，对于含杂质较多的抗原可以采用间接捕获法包被(先用能够与目的抗原反应的物质如抗体直接吸附在酶标...
PCR引物设计和选择遵循原则2023/5/15
PCR反应产物的特异性由一对上下游引物所决定。引物的好坏往往是PCR成败的关键。引物设计和选择目的DNA序列区域时可遵循下列原则：1、引物长度约为16-30bp，太短会降低退火温度影响引物与模板配对，...
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