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产地 | 进口 | 加工定制 | 是 |
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适用领域 | 科研 |
实验注意事项:
1)RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料,不同的样本有不同要求,实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况;
2)客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号;
3)客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4)样本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类,探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加,非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量(包括定量和相对定量)和定性分析。
主要服务:DNA或RNA的定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术:引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR
产品名称 | |
规格 | 48T/盒 |
编号 | FS-R2586 |
反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
PTH1R Others Human 人 PTH1R / PTHR1 / PTH1 Receptor 人细胞裂解液 (阳性对照) 酮麝香(标准品)Musk ketone质量规格:HPLC≥98%,标准品
NCI-H1650 人非小细胞肺癌细胞苯甲酰基十字孢碱(PKC-412)Midostaurin质量规格:≥96%,美国进口
SW 1990 [SW-1990, SW1990] , 人胰腺癌细胞无水邻菲啰啉;1,10-菲罗啉1,10 –Phenanthroline anhydrous质量规格:AR,>99%
THPO Protein Human 重组人 Thrombopoietin / THPO / TPO 蛋白 (His 标签)邻菲啰啉一水;1,10-菲罗啉一水1,10-Phenanthroline hydrate质量规格:AR,>99%
人浸润性导管癌旁皮肤细胞;CCD-1095Sk 人成纤维细胞*培养基 100mL邻菲啰啉盐酸盐一水;1,10-菲罗啉盐酸盐1,10-Phenanthroline hydrochloride monohydrate质量规格:AR,>99%
人角膜上皮细胞*培养基 100mL二甲基亚砜(AR,>99%(GC)) Dimethyl sulfoxide质量规格:AR,>99%(GC)
HPT-8细胞,小鼠饲养层上皮细胞 293(转染腺病毒E1A基因的人肾上皮细胞) 长白山猪胚胎皮肤成纤维样细胞;201184二甲基亚砜(>99.8%(GC)) Dimethyl sulfoxide质量规格:>99.8%(GC)
EFNB2 Protein Human 重组人 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白 (His & Fc 标签)二甲基亚砜(分子生物学,≥99.9%) Dimethyl sulfoxide质量规格:分子生物学,≥99.9%
EA.hy926(人脐静脉细胞融合细胞) 5×106cells/瓶×2 大隐静脉平滑肌细胞Many types of cells包装:5 × 105次方(1ml)二甲基亚砜(多肽合成) Dimethyl sulfoxide质量规格:多肽合成
人脑微血管内皮细胞HBMEC二甲基亚砜(药用级) Dimethyl sulfoxide质量规格:药用级
RSPO1 Others Human 人 RSPO1 / R-Spondin-1 (aa 1-146) 人细胞裂解液 (阳性对照) 2'-脱氧鸟苷一水合物2'-Deoxyguanosine monohydrate质量规格:美国进口
CSSTH1 中华鳖心肌来源细胞N2-苯氧基乙酰基鸟嘌呤N2-Phenoxyacetyl Guanine质量规格:美国进口
T-107B中性蛋白酶(含100mL酶解缓冲液)10mL2'-脱氧胞苷-5'-二磷酸三钠盐(分子生物学级)dCDP, 2'-Deoxycytidine-5'-Diphosphate,3sodium salt质量规格:>97%,分子生物学级
RGC-5, 小鼠视网膜神经节细胞DMPDMP质量规格:BR
EB病毒转化的人B淋巴细胞;Mao 人骨骼肌细胞*培养基 100mL没食子酸月桂酯(>98.5%,BR)Dodecyl gallate质量规格:>98.5%,BR
转基因大豆EPSPS基因核酸检测试剂盒图片人心脏成纤维细胞-心室HCF-av奈拉滨质量规格:>99.0%,细胞培养级Nelarabine
gpc-1细胞,人前列腺癌细胞 兔眼Tenon's囊成纤维细胞,RYTF细胞 大鼠背脊髓神经元RN-dsc醋酸奈西立肽质量规格:>95%Nesiritide Acetate
K7M2 wt(小鼠骨肉瘤成骨细胞) 5×106cells/瓶×2硫酸镁七水(分子生物学级)质量规格:>98%,分子生物Magnesium sulfate, heptahydrate
A-431(人表皮癌细胞) 5×106cells/瓶×2 CM-H131人角膜成纤维细胞*培养基100mL 人羊膜细胞;HA糖化酶;葡萄糖淀粉酶质量规格:BR,10万u/GGlucozyme
CM-R007大鼠支气管上皮细胞*培养基100mL聚乙二醇4000质量规格:>99%,BRPEG 4000
技术服务内容:
实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳,以软件分析电泳条带的灰度值(IOD值),通过与内参基因的灰度值比较,判断目的mRNA的相对表达量。
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