登革热病毒1型（DFV-I）核酸检测试剂盒供应商 返回列表页

登革热病毒1型(DFV-I)核酸检测试剂盒供应商反应五要素：
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基，特别是末及倒数第二个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以低引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。

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技术服务内容：
实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳，以软件分析电泳条带的灰度值（IOD值），通过与内参基因的灰度值比较，判断目的mRNA的相对表达量。
兔肾细胞;RK13他唑巴坦钠 Tazobactam sodium质量规格：含量>90%%,BR

NOV Others Canine 狗 CCN3 / NOV 人细胞裂解液 (阳性对照) 他唑巴坦钠 (标准品)Tazobactam sodium质量规格：含量测定，标准品

CL-0133KLE(人子宫内膜癌细胞)5×106cells/瓶×2D-环丝氨酸D-Cycloserine质量规格：>98%,效价>900µg/mg,BR,可用于细胞培养

P3/NS1/1-Ag4-1细胞，鼠骨髓瘤细胞 人B淋巴细胞瘤细胞,RAMOS(RA.1)细胞 小鼠子细胞;U14D-环丝氨酸(标准品)D-Cycloserine质量规格：标准品用于含量测定

ARPE-19(人视网膜上皮细胞) 5×106cells/瓶×2盐酸四环素Tetracycline hydrochloride质量规格：Purity>98%,Potency≥900μg/mg, USP grade
SDF2 Others Mouse 小鼠 SDF2 / SDF-2 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 反油酸（标准品）Elaidic acid质量规格：分析标准品,≥99.0% (GC)

小鼠骨髓瘤细胞;Fox-NY十七碳酸（标准品）Heptadecanoic acid质量规格：分析标准品

SK-OV-3细胞，卵巢癌细胞 人胃癌细胞系,HS-746T细胞 豹猫肌肉成纤维样细胞;LCM4十七碳酸（98%）Heptadecanoic acid质量规格：0.98

tTA基因修饰的小鼠畸胎瘤细胞(B类);F9-CAG-tTA-4D6隐色孔雀石绿（标准品）Leucomalachite Green质量规格：分析标准品

HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/turkey/Turkey/1/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人细胞裂解液 (阳性对照) 二十酸甲酯（标准品）Methyl Arachidate质量规格：≥98.0%(GC)
滑膜细胞Many types of cells包装：5 × 105次方(1ml)4-硝基邻苯二甲腈(>98.0%(GC))4-Nitrophthalonitrile质量规格：>98.0%(GC)

TNFRSF11A Others Rat 大鼠 TNFRSF11A 人细胞裂解液 (阳性对照) 3-硝基邻苯二甲腈(>98.0%(GC))3-Nitrophthalonitrile质量规格：>98.0%(GC)

大鼠大隐静脉内皮细胞*培养基 100mL4,4'-双甲氧基三苯甲基氯DMT-CL质量规格：>97%

293FT人胚肾细胞-用于慢病毒包装 Human embryonic kidney cell line 293FT - for leiviral packaging 人胚肾细胞N-苯甲酰-N-苯基羟胺;钽试剂;BPHAN-Phenylbenzohydroxamic Acid;Tantalon质量规格：>98%;AR

IFNA14 Protein Mouse 重组小鼠 IFNA14 / Ierferon alpha-14 蛋白 (His 标签)6-氯鸟嘌呤核苷6-Chloroguanosine质量规格：>98%,BR
CD226 Others Rat 大鼠 CD226 / DNAM-1 人细胞裂解液 (阳性对照) 百里香酚酞质量规格：AR;INDThymolphthalein

大鼠腹脊髓神经元RN-vsc钍试剂质量规格：0.9Thorin

JEG细胞，人绒毛膜癌 大鼠肝细胞,IAR20细胞 人心脏成纤维细胞-心房HCF-aa美洛昔康（标准品）质量规格：HPLC>98%,标准品Meloxicam

HuTu-80(人十二脂肠腺癌) 5×106cells/瓶×2盐酸美金刚胺质量规格：>99%Memantine HCl

769-P(人肾细胞腺癌细胞) 5×106cells/瓶×2 CM-H083人脐动脉内皮细胞*培养基100mL 人间充质干细胞-骨髓RNAHMSC-bm miRNA5 μg盐酸美金刚（标准品）质量规格：含量测定Memantine hydrochloride

实验注意事项：
1）RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料，不同的样本有不同要求，实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况；
2）客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号；
3）客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4）样本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类，探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加，非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量（包括定量和相对定量）和定性分析。
主要服务：DNA或RNA的定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术：引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR